మొక్కల ప్రత్యేక జీవక్రియ యొక్క నమూనాలను వివరించడానికి వివిధ మొక్కల రక్షణ సిద్ధాంతాలు ముఖ్యమైన సైద్ధాంతిక మార్గదర్శకత్వాన్ని అందిస్తాయి, అయితే వాటి కీలక అంచనాలు ఇంకా పరీక్షించబడలేదు. ఇక్కడ, పొగాకు అటెన్యూయేటెడ్ జాతుల జీవక్రియను వ్యక్తిగత మొక్కల నుండి జనాభా మరియు దగ్గరి సంబంధం ఉన్న జాతుల వరకు క్రమపద్ధతిలో అన్వేషించడానికి మేము నిష్పాక్షికమైన టెన్డం మాస్ స్పెక్ట్రోమెట్రీ (MS/MS) విశ్లేషణను ఉపయోగించాము మరియు సమాచారంలోని సమ్మేళన వర్ణపటం ఆధారంగా పెద్ద సంఖ్యలో మాస్ స్పెక్ట్రోమెట్రిక్ లక్షణ సిద్ధాంతాలను ప్రాసెస్ చేసాము. ఆప్టిమల్ డిఫెన్స్ (OD) మరియు కదిలే లక్ష్యం (MT) సిద్ధాంతాల కీలక అంచనాలను పరీక్షించడానికి ఫ్రేమ్‌వర్క్. మొక్కల జీవక్రియ యొక్క సమాచార భాగం OD సిద్ధాంతానికి అనుగుణంగా ఉంటుంది, కానీ శాకాహారుల వల్ల కలిగే జీవక్రియ డైనమిక్స్‌పై MT సిద్ధాంతం యొక్క ప్రధాన అంచనాకు విరుద్ధంగా ఉంటుంది. సూక్ష్మ నుండి స్థూల పరిణామ స్థాయి వరకు, జాస్మోనేట్ సిగ్నల్ OD యొక్క ప్రధాన నిర్ణాయకంగా గుర్తించబడింది, అయితే ఇథిలీన్ సిగ్నల్ MS/MS మాలిక్యులర్ నెట్‌వర్క్ ద్వారా వ్యాఖ్యానించబడిన శాకాహారి-నిర్దిష్ట ప్రతిస్పందన యొక్క చక్కటి-ట్యూనింగ్‌ను అందించింది.
విభిన్న నిర్మాణాలతో కూడిన ప్రత్యేక జీవక్రియలు పర్యావరణానికి అనుగుణంగా మొక్కలను మార్చడంలో ప్రధాన భాగస్వాములు, ముఖ్యంగా శత్రువుల రక్షణలో (1). మొక్కలలో కనిపించే ప్రత్యేక జీవక్రియ యొక్క అద్భుతమైన వైవిధ్యం దాని పర్యావరణ విధుల యొక్క అనేక అంశాలపై దశాబ్దాలుగా లోతైన పరిశోధనను ప్రేరేపించింది మరియు మొక్కల రక్షణ సిద్ధాంతాల యొక్క సుదీర్ఘ జాబితాను రూపొందించింది, అవి మొక్క-కీటకాల పరస్పర చర్యల పరిణామాత్మక మరియు పర్యావరణ అభివృద్ధి. అనుభావిక పరిశోధన ముఖ్యమైన మార్గదర్శకత్వాన్ని అందిస్తుంది (2). అయితే, ఈ మొక్కల రక్షణ సిద్ధాంతాలు ఊహాజనిత తగ్గింపు తార్కికం యొక్క ప్రామాణిక మార్గాన్ని అనుసరించలేదు, దీనిలో కీలక అంచనాలు విశ్లేషణ స్థాయిలో ఉన్నాయి (3) మరియు సైద్ధాంతిక అభివృద్ధి యొక్క తదుపరి చక్రాన్ని ముందుకు తీసుకెళ్లడానికి ప్రయోగాత్మకంగా పరీక్షించబడ్డాయి (4). సాంకేతిక పరిమితులు డేటా సేకరణను నిర్దిష్ట జీవక్రియ వర్గాలకు పరిమితం చేస్తాయి మరియు ప్రత్యేక జీవక్రియల యొక్క సమగ్ర విశ్లేషణను మినహాయించాయి, తద్వారా సైద్ధాంతిక అభివృద్ధికి అవసరమైన అంతర్-వర్గ పోలికలను నిరోధిస్తాయి (5). సమగ్ర జీవక్రియ డేటా మరియు వివిధ మొక్కల సమూహాల మధ్య జీవక్రియ స్థలం యొక్క ప్రాసెసింగ్ వర్క్‌ఫ్లోను పోల్చడానికి ఒక సాధారణ కరెన్సీ లేకపోవడం ఈ క్షేత్రం యొక్క శాస్త్రీయ పరిపక్వతకు ఆటంకం కలిగిస్తుంది.
టెన్డం మాస్ స్పెక్ట్రోమెట్రీ (MS/MS) జీవక్రియ రంగంలో తాజా పరిణామాలు ఇచ్చిన సిస్టమ్ క్లాడ్ యొక్క జాతుల లోపల మరియు వాటి మధ్య జీవక్రియ మార్పులను సమగ్రంగా వర్గీకరించగలవు మరియు ఈ సంక్లిష్ట మిశ్రమాల మధ్య నిర్మాణాత్మక సారూప్యతను లెక్కించడానికి గణన పద్ధతులతో కలపవచ్చు. రసాయన శాస్త్రం యొక్క ముందస్తు జ్ఞానం (5). విశ్లేషణ మరియు కంప్యూటింగ్‌లో అధునాతన సాంకేతికతల కలయిక జీవక్రియ వైవిధ్యం యొక్క పర్యావరణ మరియు పరిణామ సిద్ధాంతాల ద్వారా చేసిన అనేక అంచనాల దీర్ఘకాలిక పరీక్షకు అవసరమైన చట్రాన్ని అందిస్తుంది. షానన్ (6) 1948లో తన సెమినల్ వ్యాసంలో మొదటిసారిగా సమాచార సిద్ధాంతాన్ని ప్రవేశపెట్టాడు, సమాచారం యొక్క గణిత విశ్లేషణకు పునాది వేశాడు, ఇది దాని అసలు అప్లికేషన్ కాకుండా అనేక రంగాలలో ఉపయోగించబడింది. జన్యుశాస్త్రంలో, సీక్వెన్స్ కన్జర్వేటివ్ సమాచారాన్ని లెక్కించడానికి సమాచార సిద్ధాంతం విజయవంతంగా వర్తించబడింది (7). ట్రాన్స్‌క్రిప్టోమిక్స్ పరిశోధనలో, సమాచార సిద్ధాంతం ట్రాన్స్‌క్రిప్టోమ్‌లోని మొత్తం మార్పులను విశ్లేషిస్తుంది (8). మునుపటి పరిశోధనలో, మొక్కలలోని కణజాల స్థాయి యొక్క జీవక్రియ నైపుణ్యాన్ని వివరించడానికి మేము సమాచార సిద్ధాంతం యొక్క గణాంక చట్రాన్ని జీవక్రియ శాస్త్రానికి వర్తింపజేసాము (9). ఇక్కడ, శాకాహారులచే ప్రేరేపించబడిన జీవక్రియ యొక్క మొక్కల రక్షణ సిద్ధాంతం యొక్క ముఖ్య అంచనాలను పోల్చడానికి, సాధారణ కరెన్సీలో జీవక్రియ వైవిధ్యం ద్వారా వర్గీకరించబడిన సమాచార సిద్ధాంతం యొక్క గణాంక చట్రంతో MS/MS- ఆధారిత వర్క్‌ఫ్లోను కలుపుతాము.
మొక్కల రక్షణ యొక్క సైద్ధాంతిక చట్రాలు సాధారణంగా పరస్పరం కలుపుకొని ఉంటాయి మరియు వాటిని రెండు వర్గాలుగా విభజించవచ్చు: ఆప్టిమల్ డిఫెన్స్ (OD) (10), మూవింగ్ టార్గెట్ (MT) (11) ) మరియు ప్రదర్శన (12) సిద్ధాంతం వంటి రక్షణ విధుల ఆధారంగా మొక్కల-నిర్దిష్ట జీవక్రియల పంపిణీని వివరించడానికి ప్రయత్నించేవి, మరికొందరు వనరుల లభ్యతలో మార్పులు మొక్కల పెరుగుదలను మరియు కార్బన్ వంటి ప్రత్యేక జీవక్రియల సంచితాన్ని ఎలా ప్రభావితం చేస్తాయో యాంత్రిక వివరణలను కోరుకుంటాయి: పోషక సమతుల్య పరికల్పన (13), వృద్ధి రేటు పరికల్పన (14) మరియు పెరుగుదల మరియు భేదాత్మక సమతుల్య పరికల్పన (15). రెండు సెట్ల సిద్ధాంతాలు విశ్లేషణ యొక్క విభిన్న స్థాయిలలో ఉన్నాయి (4). అయితే, క్రియాత్మక స్థాయిలో రక్షణాత్మక విధులను కలిగి ఉన్న రెండు సిద్ధాంతాలు మొక్కల నిర్మాణాత్మక మరియు ప్రేరేపిత రక్షణల గురించి సంభాషణలో ఆధిపత్యం చెలాయిస్తాయి: OD సిద్ధాంతం, ఇది మొక్కలు అవసరమైనప్పుడు మాత్రమే వాటి ఖరీదైన రసాయన రక్షణలలో పెట్టుబడి పెడతాయని ఊహిస్తుంది, ఉదాహరణకు, అవి తీసుకున్నప్పుడు గడ్డి జంతువు దాడి చేసినప్పుడు, కాబట్టి, భవిష్యత్తులో దాడి చేసే అవకాశం ప్రకారం, రక్షణాత్మక పనితీరుతో కూడిన సమ్మేళనం కేటాయించబడుతుంది (10); MT పరికల్పన ప్రకారం దిశాత్మక జీవక్రియ మార్పుకు అక్షం లేదు, కానీ జీవక్రియ యాదృచ్ఛికంగా మారుతుంది, తద్వారా శాకాహారుల దాడి యొక్క జీవక్రియ "చలన లక్ష్యం"ని అడ్డుకునే అవకాశం ఏర్పడుతుంది. మరో మాటలో చెప్పాలంటే, ఈ రెండు సిద్ధాంతాలు శాకాహారుల దాడి తర్వాత సంభవించే జీవక్రియ పునర్నిర్మాణం గురించి వ్యతిరేక అంచనాలను ఇస్తాయి: రక్షణాత్మక పనితీరు (OD) కలిగిన జీవక్రియల ఏక దిశాత్మక సంచితం మరియు నిర్దేశిత జీవక్రియ మార్పులు (MT) (11) మధ్య సంబంధం.
OD మరియు MT పరికల్పనలు జీవక్రియలో ప్రేరేపిత మార్పులను మాత్రమే కాకుండా, ఈ జీవక్రియల సంచితం యొక్క పర్యావరణ మరియు పరిణామ పరిణామాలను కూడా కలిగి ఉంటాయి, ఉదాహరణకు ఒక నిర్దిష్ట పర్యావరణ వాతావరణంలో ఈ జీవక్రియ మార్పుల యొక్క అనుకూల ఖర్చులు మరియు ప్రయోజనాలు (16). రెండు పరికల్పనలు ప్రత్యేకమైన జీవక్రియల యొక్క రక్షణాత్మక పనితీరును గుర్తించినప్పటికీ, అవి ఖరీదైనవి కావచ్చు లేదా కాకపోవచ్చు, OD మరియు MT పరికల్పనలను వేరు చేసే కీలక అంచనా ప్రేరేపిత జీవక్రియ మార్పుల దిశాత్మకతలో ఉంది. OD సిద్ధాంతం యొక్క అంచనా ఇప్పటివరకు అత్యంత ప్రయోగాత్మక దృష్టిని పొందింది. ఈ పరీక్షలలో గ్రీన్‌హౌస్‌లు మరియు సహజ పరిస్థితులలో నిర్దిష్ట సమ్మేళనాల యొక్క వివిధ కణజాలాల ప్రత్యక్ష లేదా పరోక్ష రక్షణ విధుల అధ్యయనం, అలాగే మొక్కల అభివృద్ధి దశలో మార్పులు (17-19) ఉన్నాయి. అయితే, ఇప్పటివరకు, ఏదైనా జీవి యొక్క జీవక్రియ వైవిధ్యం యొక్క ప్రపంచ సమగ్ర విశ్లేషణ కోసం వర్క్‌ఫ్లో మరియు గణాంక చట్రం లేకపోవడం వల్ల, రెండు సిద్ధాంతాల మధ్య ప్రధాన వ్యత్యాస అంచనా (అంటే, జీవక్రియ మార్పుల దిశ) పరీక్షించబడాలి. ఇక్కడ, మేము అలాంటి విశ్లేషణను అందిస్తున్నాము.
మొక్కల-నిర్దిష్ట జీవక్రియల యొక్క అత్యంత ముఖ్యమైన లక్షణాలలో ఒకటి ఒకే మొక్కలు, జనాభా నుండి సారూప్య జాతుల వరకు అన్ని స్థాయిలలో వాటి తీవ్ర నిర్మాణ వైవిధ్యం (20). ప్రత్యేకమైన జీవక్రియలలో అనేక పరిమాణాత్మక మార్పులను జనాభా స్థాయిలో గమనించవచ్చు, అయితే బలమైన గుణాత్మక తేడాలు సాధారణంగా జాతుల స్థాయిలో నిర్వహించబడతాయి (20). అందువల్ల, మొక్కల జీవక్రియ వైవిధ్యం క్రియాత్మక వైవిధ్యం యొక్క ప్రధాన అంశం, ఇది వివిధ గూడులకు, ముఖ్యంగా ప్రత్యేక కీటకాలు మరియు సాధారణ శాకాహారులచే విభిన్న దండయాత్ర అవకాశాలను కలిగి ఉన్న గూడులకు అనుకూలతను ప్రతిబింబిస్తుంది (21). మొక్కల-నిర్దిష్ట జీవక్రియల ఉనికికి గల కారణాలపై ఫ్రాంకెల్ (22) యొక్క సంచలనాత్మక వ్యాసం నుండి, వివిధ కీటకాలతో పరస్పర చర్యలు ముఖ్యమైన ఎంపిక ఒత్తిళ్లుగా పరిగణించబడ్డాయి మరియు ఈ పరస్పర చర్యలు పరిణామ సమయంలో మొక్కలను ఆకృతి చేశాయని నమ్ముతారు. జీవక్రియ మార్గం (23). ప్రత్యేకమైన జీవక్రియల వైవిధ్యంలో అంతర్జాతుల తేడాలు శాకాహార వ్యూహాలకు వ్యతిరేకంగా నిర్మాణాత్మక మరియు ప్రేరేపించదగిన మొక్కల రక్షణతో సంబంధం ఉన్న శారీరక సమతుల్యతను కూడా ప్రతిబింబిస్తాయి, ఎందుకంటే రెండు జాతులు తరచుగా ఒకదానితో ఒకటి ప్రతికూలంగా సంబంధం కలిగి ఉంటాయి (24). అన్ని సమయాల్లో మంచి రక్షణను నిర్వహించడం ప్రయోజనకరంగా ఉన్నప్పటికీ, రక్షణతో ముడిపడి ఉన్న సకాలంలో జీవక్రియ మార్పులు మొక్కలు ఇతర శారీరక పెట్టుబడులకు విలువైన వనరులను కేటాయించడానికి అనుమతించడంలో స్పష్టమైన ప్రయోజనాలను అందిస్తాయి (19, 24), మరియు సహజీవనం అవసరాన్ని నివారించండి. అనుషంగిక నష్టం (25). అదనంగా, కీటకాల శాకాహారుల వల్ల కలిగే ప్రత్యేక జీవక్రియల పునర్వ్యవస్థీకరణలు జనాభాలో విధ్వంసక పంపిణీకి దారితీయవచ్చు (26), మరియు జాస్మోనిక్ ఆమ్లం (JA) సిగ్నల్‌లో గణనీయమైన సహజ మార్పుల ప్రత్యక్ష రీడింగులను ప్రతిబింబించవచ్చు, ఇది జనాభాలో నిర్వహించబడవచ్చు. అధిక మరియు తక్కువ JA సంకేతాలు శాకాహారులకు వ్యతిరేకంగా రక్షణ మరియు నిర్దిష్ట జాతులతో పోటీ మధ్య ట్రేడ్-ఆఫ్‌లు (27). అదనంగా, ప్రత్యేకమైన మెటాబోలైట్ బయోసింథటిక్ మార్గాలు పరిణామం సమయంలో వేగంగా నష్టం మరియు పరివర్తనకు లోనవుతాయి, ఫలితంగా దగ్గరి సంబంధం ఉన్న జాతులలో పాచీ జీవక్రియ పంపిణీ జరుగుతుంది (28). మారుతున్న శాకాహారి నమూనాలకు ప్రతిస్పందనగా ఈ పాలిమార్ఫిజమ్‌లను వేగంగా స్థాపించవచ్చు (29), అంటే శాకాహారి సంఘాల హెచ్చుతగ్గులు జీవక్రియ వైవిధ్యతను నడిపించే కీలక అంశం.
ఇక్కడ, మేము ప్రత్యేకంగా ఈ క్రింది సమస్యలను పరిష్కరించాము. (I) శాకాహార కీటకం మొక్కల జీవక్రియను ఎలా పునర్నిర్మిస్తుంది? (Ii) దీర్ఘకాలిక రక్షణ సిద్ధాంతం యొక్క అంచనాలను పరీక్షించడానికి లెక్కించగల జీవక్రియ ప్లాస్టిసిటీ యొక్క ప్రధాన సమాచార భాగాలు ఏమిటి? (Iii) దాడి చేసేవారికి ప్రత్యేకమైన విధంగా మొక్కల జీవక్రియను తిరిగి ప్రోగ్రామ్ చేయాలా, అలా అయితే, నిర్దిష్ట జీవక్రియ ప్రతిస్పందనను రూపొందించడంలో మొక్కల హార్మోన్ ఏ పాత్ర పోషిస్తుంది మరియు రక్షణ యొక్క జాతుల విశిష్టతకు ఏ జీవక్రియలు దోహదం చేస్తాయి? (Iv) అనేక రక్షణ సిద్ధాంతాల ద్వారా చేసిన అంచనాలను అన్ని స్థాయిల జీవ కణజాలాలలో విస్తరించవచ్చు కాబట్టి, అంతర్గత పోలిక నుండి అంతర్జాతుల పోలిక వరకు జీవక్రియ ప్రతిస్పందన ఎంత స్థిరంగా ఉందో మేము అడిగాము? ఈ లక్ష్యంతో, మేము పొగాకు నికోటిన్ యొక్క ఆకు జీవక్రియను క్రమపద్ధతిలో అధ్యయనం చేసాము, ఇది గొప్ప ప్రత్యేక జీవక్రియతో కూడిన పర్యావరణ నమూనా మొక్క, మరియు రెండు స్థానిక శాకాహారుల లార్వాలకు వ్యతిరేకంగా ప్రభావవంతంగా ఉంటుంది, లెపిడోప్టెరా డాతురా (Ms) (చాలా దూకుడుగా, ప్రధానంగా తినబడుతుంది). సోలనేసి మరియు స్పోడోప్టెరా లిట్టోరాలిస్ (Sl) లలో, పత్తి ఆకు పురుగులు ఒక రకమైన "జాతి", సోలనేసి యొక్క హోస్ట్ మొక్కలు మరియు ఇతర జాతులు మరియు కుటుంబాల ఇతర హోస్ట్‌లు మొక్కల ఆహారం. మేము MS/MS మెటబోలోమిక్స్ స్పెక్ట్రమ్‌ను అన్వయించాము మరియు OD మరియు MT సిద్ధాంతాలను పోల్చడానికి సమాచార సిద్ధాంత గణాంక వివరణలను సేకరించాము. కీలక జీవక్రియల గుర్తింపును బహిర్గతం చేయడానికి నిర్దిష్టత పటాలను సృష్టించండి. మొక్కల హార్మోన్ సిగ్నలింగ్ మరియు OD ప్రేరణ మధ్య సహవిభేదాన్ని మరింత విశ్లేషించడానికి విశ్లేషణ N. నాసి యొక్క స్థానిక జనాభా మరియు దగ్గరి సంబంధం ఉన్న పొగాకు జాతులకు విస్తరించబడింది.
శాకాహార పొగాకు యొక్క ఆకు జీవక్రియ యొక్క ప్లాస్టిసిటీ మరియు నిర్మాణం గురించి మొత్తం మ్యాప్‌ను సంగ్రహించడానికి, మొక్కల సారాల నుండి అధిక-రిజల్యూషన్ డేటా స్వతంత్ర MS/MS స్పెక్ట్రాను సమగ్రంగా సేకరించి విడదీయడానికి మేము గతంలో అభివృద్ధి చేసిన విశ్లేషణ మరియు గణన వర్క్‌ఫ్లోను ఉపయోగించాము (9). ఈ విభిన్న పద్ధతి (MS/MS అని పిలుస్తారు) అనవసరమైన సమ్మేళన వర్ణపటాన్ని నిర్మించగలదు, దీనిని ఇక్కడ వివరించిన అన్ని సమ్మేళన-స్థాయి విశ్లేషణలకు ఉపయోగించవచ్చు. ఈ విడదీయబడిన మొక్కల జీవక్రియలు వివిధ రకాలుగా ఉంటాయి, వీటిలో వందల నుండి వేల వరకు జీవక్రియలు ఉంటాయి (ఇక్కడ దాదాపు 500-1000-s/MS/MS). ఇక్కడ, మేము సమాచార సిద్ధాంతం యొక్క చట్రంలో జీవక్రియ ప్లాస్టిసిటీని పరిగణిస్తాము మరియు జీవక్రియ ఫ్రీక్వెన్సీ పంపిణీ యొక్క షానన్ ఎంట్రోపీ ఆధారంగా జీవక్రియ యొక్క వైవిధ్యం మరియు వృత్తి నైపుణ్యాన్ని అంచనా వేస్తాము. గతంలో అమలు చేయబడిన ఫార్ములా (8) ఉపయోగించి, జీవక్రియ వైవిధ్యం (Hj సూచిక), జీవక్రియ ప్రొఫైల్ స్పెషలైజేషన్ (δj సూచిక) మరియు ఒకే జీవక్రియ (Si సూచిక) యొక్క జీవక్రియ విశిష్టతను లెక్కించడానికి ఉపయోగించే సూచికల సమితిని మేము లెక్కించాము. అదనంగా, శాకాహారుల జీవక్రియ ప్రేరణను లెక్కించడానికి మేము సాపేక్ష దూర ప్లాస్టిసిటీ సూచిక (RDPI)ని వర్తింపజేసాము (మూర్తి 1A) (30). ఈ గణాంక చట్రంలో, మేము MS/MS స్పెక్ట్రమ్‌ను ప్రాథమిక సమాచార యూనిట్‌గా పరిగణిస్తాము మరియు MS/MS యొక్క సాపేక్ష సమృద్ధిని ఫ్రీక్వెన్సీ పంపిణీ మ్యాప్‌లోకి ప్రాసెస్ చేస్తాము, ఆపై దాని నుండి జీవక్రియ వైవిధ్యాన్ని అంచనా వేయడానికి షానన్ ఎంట్రోపీని ఉపయోగిస్తాము. జీవక్రియ ప్రత్యేకత ఒకే MS/MS స్పెక్ట్రం యొక్క సగటు విశిష్టత ద్వారా కొలుస్తారు. అందువల్ల, శాకాహారి ప్రేరణ తర్వాత కొన్ని MS/MS తరగతుల సమృద్ధిలో పెరుగుదల స్పెక్ట్రల్ ప్రేరణ, RDPI మరియు ప్రత్యేకతగా రూపాంతరం చెందుతుంది, అంటే, δj సూచికలో పెరుగుదల, ఎందుకంటే మరింత ప్రత్యేకమైన జీవక్రియలు ఉత్పత్తి చేయబడతాయి మరియు అధిక Si సూచిక ఉత్పత్తి అవుతుంది. Hj వైవిధ్య సూచికను తగ్గించడం వలన ఉత్పత్తి చేయబడిన MS/MS సంఖ్య తగ్గుతుందని లేదా ప్రొఫైల్ ఫ్రీక్వెన్సీ పంపిణీ తక్కువ ఏకరీతి దిశలో మారుతుందని ప్రతిబింబిస్తుంది, అదే సమయంలో దాని మొత్తం అనిశ్చితిని తగ్గిస్తుంది. Si సూచిక గణన ద్వారా, కొన్ని శాకాహారులచే ఏ MS/MS ప్రేరేపించబడుతుందో హైలైట్ చేయడం సాధ్యమవుతుంది, దీనికి విరుద్ధంగా, ఏ MS/MS ప్రేరణకు ప్రతిస్పందించదు, ఇది MT మరియు OD అంచనాను వేరు చేయడానికి కీలక సూచిక.
(ఎ) శాకాహార (H1 నుండి Hx) MS/MS డేటా-ప్రేరకత (RDPI), వైవిధ్యం (Hj సూచిక), స్పెషలైజేషన్ (δj సూచిక) మరియు మెటాబోలైట్ విశిష్టత (Si సూచిక) కోసం ఉపయోగించే గణాంక వివరణలు. స్పెషలైజేషన్ (δj) డిగ్రీ పెరుగుదల సగటున, ఎక్కువ శాకాహార నిర్దిష్ట జీవక్రియలు ఉత్పత్తి అవుతాయని సూచిస్తుంది, అయితే వైవిధ్యంలో తగ్గుదల (Hj) పంపిణీ పటంలో జీవక్రియల ఉత్పత్తిలో తగ్గుదల లేదా జీవక్రియల అసమాన పంపిణీని సూచిస్తుంది. Si విలువ జీవక్రియ ఇచ్చిన స్థితికి (ఇక్కడ, శాకాహార) నిర్దిష్టంగా ఉందా లేదా దానికి విరుద్ధంగా అదే స్థాయిలో నిర్వహించబడుతుందా అని అంచనా వేస్తుంది. (బి) సమాచార సిద్ధాంత అక్షాన్ని ఉపయోగించి రక్షణ సిద్ధాంత అంచనా యొక్క సంభావిత రేఖాచిత్రం. OD సిద్ధాంతం శాకాహార దాడి రక్షణ జీవక్రియలను పెంచుతుందని అంచనా వేస్తుంది, తద్వారా δj పెరుగుతుంది. అదే సమయంలో, జీవక్రియ సమాచారం యొక్క తగ్గిన అనిశ్చితి వైపు ప్రొఫైల్ పునర్వ్యవస్థీకరించబడినందున Hj తగ్గుతుంది. శాకాహారుల దాడి జీవక్రియలో దిశాత్మక మార్పులకు కారణమవుతుందని MT సిద్ధాంతం అంచనా వేస్తుంది, తద్వారా జీవక్రియ సమాచార అనిశ్చితి పెరుగుదలకు సూచికగా Hj పెరుగుతుంది మరియు Si యొక్క యాదృచ్ఛిక పంపిణీకి కారణమవుతుంది. మేము మిశ్రమ నమూనాను కూడా ప్రతిపాదించాము, ఉత్తమ MT, దీనిలో అధిక రక్షణ విలువలు కలిగిన కొన్ని జీవక్రియలు ముఖ్యంగా పెరుగుతాయి (అధిక Si విలువ), మరికొన్ని యాదృచ్ఛిక ప్రతిస్పందనలను ప్రదర్శిస్తాయి (తక్కువ Si విలువ).
సమాచార సిద్ధాంత వివరణలను ఉపయోగించి, ప్రేరేపించబడని నిర్మాణాత్మక స్థితిలో శాకాహార-ప్రేరిత ప్రత్యేక జీవక్రియ మార్పులు (i) జీవక్రియ విశిష్టత (Si సూచిక) పెరుగుదలకు (δj సూచిక) జీవక్రియ విశిష్టతను నడిపించడానికి (δj సూచిక) దారితీస్తాయని అంచనా వేయడానికి మేము OD సిద్ధాంతాన్ని అర్థం చేసుకుంటాము. అధిక రక్షణ విలువ కలిగిన కొన్ని ప్రత్యేక జీవక్రియ సమూహాల పెరుగుదల మరియు (ii) జీవక్రియ ఫ్రీక్వెన్సీ పంపిణీని ఎక్కువ లెప్టిన్ శరీర పంపిణీకి మార్చడం వల్ల జీవక్రియ వైవిధ్యం (Hj సూచిక) తగ్గడం. ఒకే జీవక్రియ స్థాయిలో, ఆర్డర్ చేయబడిన Si పంపిణీని ఆశించబడుతుంది, ఇక్కడ జీవక్రియ దాని రక్షణ విలువ ప్రకారం Si విలువను పెంచుతుంది (మూర్తి 1B). ఈ మార్గంలో, ఉత్తేజితం (i) జీవక్రియలలో దిశాత్మకం కాని మార్పులకు దారితీస్తుందని అంచనా వేయడానికి మేము MT సిద్ధాంతాన్ని వివరిస్తాము, ఫలితంగా δj సూచికలో తగ్గుదల మరియు (ii) జీవక్రియ అనిశ్చితి పెరుగుదల కారణంగా Hj సూచికలో పెరుగుదల. లేదా యాదృచ్ఛికత, దీనిని సాధారణీకరించిన వైవిధ్యం రూపంలో షానన్ ఎంట్రోపీ ద్వారా లెక్కించవచ్చు. జీవక్రియ కూర్పు విషయానికొస్తే, MT సిద్ధాంతం Si యొక్క యాదృచ్ఛిక పంపిణీని అంచనా వేస్తుంది. కొన్ని జీవక్రియలు నిర్దిష్ట పరిస్థితులలో నిర్దిష్ట పరిస్థితులలో ఉంటాయని మరియు ఇతర పరిస్థితులు నిర్దిష్ట పరిస్థితులలో ఉండవని మరియు వాటి రక్షణ విలువ పర్యావరణంపై ఆధారపడి ఉంటుందని పరిగణనలోకి తీసుకుని, మేము మిశ్రమ రక్షణ నమూనాను కూడా ప్రతిపాదించాము, దీనిలో δj మరియు Hj లు అన్ని దిశలలో Si పెరుగుదలతో పాటు రెండుగా పంపిణీ చేయబడతాయి, అధిక రక్షణ విలువలను కలిగి ఉన్న కొన్ని జీవక్రియ సమూహాలు మాత్రమే ముఖ్యంగా Si ని పెంచుతాయి, మరికొన్ని యాదృచ్ఛిక పంపిణీని కలిగి ఉంటాయి (మూర్తి 1B).
సమాచార సిద్ధాంత వివరణ యొక్క అక్షంపై పునర్నిర్వచించబడిన రక్షణ సిద్ధాంత అంచనాను పరీక్షించడానికి, మేము నెపెంథెస్ పల్లెన్స్ ఆకులపై నిపుణుడు (Ms) లేదా జనరలిస్ట్ (Sl) శాకాహారి లార్వాలను పెంచాము (మూర్తి 2A). MS/MS విశ్లేషణను ఉపయోగించి, గొంగళి పురుగు దాణా తర్వాత సేకరించిన ఆకు కణజాలం యొక్క మిథనాల్ సారం నుండి మేము 599 అనవసరమైన MS/MS స్పెక్ట్రా (డేటా ఫైల్ S1)ను తిరిగి పొందాము. MS/MS కాన్ఫిగరేషన్ ఫైల్‌లలో సమాచార కంటెంట్ యొక్క పునఃఆకృతీకరణను దృశ్యమానం చేయడానికి RDPI, Hj మరియు δj సూచికలను ఉపయోగించడం ఆసక్తికరమైన నమూనాలను వెల్లడిస్తుంది (మూర్తి 2B). మొత్తం ధోరణి ఏమిటంటే, సమాచార వివరణ ద్వారా వివరించబడినట్లుగా, గొంగళి పురుగులు ఆకులను తినడం కొనసాగిస్తున్నప్పుడు, అన్ని జీవక్రియ పునర్వ్యవస్థీకరణ స్థాయి కాలక్రమేణా పెరుగుతుంది: శాకాహారి తిన్న 72 గంటల తర్వాత, RDPI గణనీయంగా పెరుగుతుంది. దెబ్బతినని నియంత్రణతో పోలిస్తే, Hj గణనీయంగా తగ్గింది, ఇది జీవక్రియ ప్రొఫైల్ యొక్క ప్రత్యేకత యొక్క పెరిగిన స్థాయి కారణంగా ఉంది, ఇది δj సూచిక ద్వారా లెక్కించబడింది. ఈ స్పష్టమైన ధోరణి OD సిద్ధాంతం యొక్క అంచనాలకు అనుగుణంగా ఉంటుంది, కానీ MT సిద్ధాంతం యొక్క ప్రధాన అంచనాలకు విరుద్ధంగా ఉంటుంది, ఇది జీవక్రియ స్థాయిలలో యాదృచ్ఛిక (దిశాత్మకం కాని) మార్పులను రక్షణాత్మక మభ్యపెట్టడానికి ఉపయోగిస్తుందని నమ్ముతుంది (మూర్తి 1B). ఈ రెండు శాకాహారుల నోటి స్రావం (OS) ఎలిసిటర్ కంటెంట్ మరియు దాణా ప్రవర్తన భిన్నంగా ఉన్నప్పటికీ, వాటి ప్రత్యక్ష దాణా 24 గంటల మరియు 72 గంటల పంట కాలంలో Hj మరియు δj దిశలలో సారూప్య మార్పులకు దారితీసింది. RDPI యొక్క 72 గంటలలో మాత్రమే తేడా సంభవించింది. Ms దాణా వల్ల కలిగే దానితో పోలిస్తే, Sl దాణా ద్వారా ప్రేరేపించబడిన మొత్తం జీవక్రియ ఎక్కువగా ఉంది.
(ఎ) ప్రయోగాత్మక రూపకల్పన: సాధారణ పంది (S1) లేదా నిపుణులైన (Ms) శాకాహారులకు పిచర్ మొక్కల డీశాలినేటెడ్ ఆకులను తినిపిస్తారు, అయితే అనుకరణ శాకాహారానికి, ప్రామాణిక ఆకు స్థానాల గాయం యొక్క పంక్చర్‌ను నిర్వహించడానికి Ms (W + OSMs) యొక్క OS ఉపయోగించబడుతుంది. S1 (W + OSSl) లార్వా లేదా నీరు (W + W). నియంత్రణ (C) అనేది దెబ్బతినని ఆకు. (బి) ఇండక్సిబిలిటీ (కంట్రోల్ చార్ట్‌తో పోలిస్తే RDPI), వైవిధ్యం (Hj సూచిక) మరియు ప్రత్యేక మెటాబోలైట్ మ్యాప్ (599 MS/MS; డేటా ఫైల్ S1) కోసం లెక్కించబడిన స్పెషలైజేషన్ (δj సూచిక) సూచిక. ప్రత్యక్ష శాకాహారి ఆహారం మరియు నియంత్రణ సమూహం (జత చేసిన t-పరీక్షతో విద్యార్థి t-పరీక్ష, *P<0.05 మరియు ***P<0.001) మధ్య గణనీయమైన తేడాలను ఆస్టరిస్క్‌లు సూచిస్తాయి. ns, ముఖ్యమైనది కాదు. (సి) అనుకరణ శాకాహార చికిత్స తర్వాత ప్రధాన (నీలి పెట్టె, అమైనో ఆమ్లం, సేంద్రీయ ఆమ్లం మరియు చక్కెర; డేటా ఫైల్ S2) మరియు ప్రత్యేక మెటాబోలైట్ స్పెక్ట్రం (ఎరుపు పెట్టె 443 MS/MS; డేటా ఫైల్ S1) యొక్క సమయ స్పష్టత సూచిక. రంగు బ్యాండ్ 95% విశ్వాస విరామాన్ని సూచిస్తుంది. చికిత్స మరియు నియంత్రణ మధ్య గణనీయమైన వ్యత్యాసాన్ని నక్షత్రం సూచిస్తుంది [చతురస్రాకార విశ్లేషణ వైవిధ్యం (ANOVA), తరువాత పోస్ట్ హాక్ బహుళ పోలికల కోసం టుకే యొక్క నిజాయితీగా ముఖ్యమైన వ్యత్యాసం (HSD), *P<0.05, **P<0.01 మరియు *** P <0.001]. (D) స్కాటర్ ప్లాట్లు మరియు ప్రత్యేక మెటాబోలైట్ ప్రొఫైల్స్ (విభిన్న చికిత్సలతో పునరావృతమయ్యే నమూనాలు) యొక్క ప్రత్యేకత.
జీవక్రియ స్థాయిలో శాకాహార-ప్రేరిత పునర్నిర్మాణం వ్యక్తిగత జీవక్రియల స్థాయిలో మార్పులలో ప్రతిబింబిస్తుందో లేదో అన్వేషించడానికి, మేము మొదట నెపెంథెస్ పల్లెన్స్ ఆకులలో నిరూపితమైన శాకాహార నిరోధకతతో గతంలో అధ్యయనం చేసిన జీవక్రియలపై దృష్టి సారించాము. ఫినోలిక్ అమైడ్‌లు హైడ్రాక్సీసిన్నమామైడ్-పాలియమైన్ సంయోగాలు, ఇవి కీటకాల శాకాహార ప్రక్రియలో పేరుకుపోతాయి మరియు కీటకాల పనితీరును తగ్గిస్తాయి (32). మేము సంబంధిత MS/MS యొక్క పూర్వగాములను శోధించాము మరియు వాటి సంచిత గతి వక్రతలను ప్లాట్ చేసాము (మూర్తి S1). ఆశ్చర్యకరంగా, క్లోరోజెనిక్ ఆమ్లం (CGA) మరియు రుటిన్ వంటి శాకాహారులకు వ్యతిరేకంగా రక్షణలో నేరుగా పాల్గొనని ఫినాల్ ఉత్పన్నాలు శాకాహారం తర్వాత తక్కువ-నియంత్రించబడతాయి. దీనికి విరుద్ధంగా, శాకాహారులు ఫినాల్ అమైడ్‌లను అత్యంత శక్తివంతమైనవిగా చేయగలవు. రెండు శాకాహారుల నిరంతర ఆహారం ఫినాలమైడ్‌ల యొక్క దాదాపు ఒకే ఉత్తేజిత వర్ణపటానికి దారితీసింది మరియు ఈ నమూనా ఫినాలమైడ్‌ల డి నోవో సంశ్లేషణకు ప్రత్యేకంగా స్పష్టంగా ఉంది. 17-హైడ్రాక్సీజెరానైల్ నోనానెడియోల్ డైటర్పీన్ గ్లైకోసైడ్స్ (17-HGL-DTGs) మార్గాన్ని అన్వేషించేటప్పుడు కూడా ఇదే దృగ్విషయం గమనించబడుతుంది, ఇది ప్రభావవంతమైన యాంటీ-హెర్బివోర్ ఫంక్షన్లతో పెద్ద సంఖ్యలో ఎసిక్లిక్ డైటర్పీన్‌లను ఉత్పత్తి చేస్తుంది (33), వీటిలో Ms ఫీడింగ్ విత్ Sl ఇలాంటి వ్యక్తీకరణ ప్రొఫైల్‌ను ప్రేరేపించింది (మూర్తి S1)).
ప్రత్యక్ష శాకాహార దాణా ప్రయోగాల యొక్క ప్రతికూలత ఏమిటంటే, ఆకు వినియోగ రేటు మరియు శాకాహారుల తినే సమయంలో వ్యత్యాసం, ఇది గాయాలు మరియు శాకాహారుల వల్ల కలిగే శాకాహార-నిర్దిష్ట ప్రభావాలను తొలగించడం కష్టతరం చేస్తుంది. ప్రేరేపిత ఆకు జీవక్రియ ప్రతిస్పందన యొక్క శాకాహార జాతుల విశిష్టతను బాగా పరిష్కరించడానికి, మేము తాజాగా సేకరించిన OS (OSM మరియు OSS1) ను స్థిరమైన ఆకు స్థానాల యొక్క ప్రామాణిక పంక్చర్ W కు వెంటనే వర్తింపజేయడం ద్వారా Ms మరియు Sl లార్వాల దాణాను అనుకరించాము. ఈ విధానాన్ని W + OS చికిత్స అంటారు, మరియు ఇది కణజాల నష్టం రేటు లేదా పరిమాణంలో తేడాల యొక్క గందరగోళ ప్రభావాలను కలిగించకుండా శాకాహారుడు ద్వారా వెలువడే ప్రతిస్పందన ప్రారంభాన్ని ఖచ్చితంగా సమయం ద్వారా ప్రేరణను ప్రామాణీకరిస్తుంది (మూర్తి 2A) (34). MS/MS విశ్లేషణ మరియు గణన పైప్‌లైన్‌ను ఉపయోగించి, మేము 443 MS/MS స్పెక్ట్రాను (డేటా ఫైల్ S1) తిరిగి పొందాము, ఇది గతంలో ప్రత్యక్ష ఫీడ్ ప్రయోగాల నుండి సమీకరించబడిన స్పెక్ట్రాతో అతివ్యాప్తి చెందింది. ఈ MS/MS డేటా సెట్ యొక్క సమాచార సిద్ధాంత విశ్లేషణ శాకాహారులను అనుకరించడం ద్వారా ఆకు-నిర్దిష్ట జీవక్రియల పునఃప్రోగ్రామింగ్ OS-నిర్దిష్ట ప్రేరణలను చూపించిందని చూపించింది (మూర్తి 2C). ముఖ్యంగా, OSS1 చికిత్సతో పోలిస్తే, OSM 4 గంటలలో జీవక్రియ ప్రత్యేకతలో మెరుగుదలకు కారణమైంది. ప్రత్యక్ష శాకాహారుల దాణా ప్రయోగాత్మక డేటా సెట్‌తో పోలిస్తే, Hj మరియు δjలను కోఆర్డినేట్‌లుగా ఉపయోగించి ద్విమితీయ స్థలంలో దృశ్యమానం చేయబడిన జీవక్రియ గతిశాస్త్రం మరియు కాలక్రమేణా అనుకరణ శాకాహారుల చికిత్సకు ప్రతిస్పందనగా జీవక్రియ ప్రత్యేకత యొక్క దిశాత్మకత స్థిరంగా పెరుగుతుందని గమనించడం విలువ (మూర్తి 2D). అదే సమయంలో, జీవక్రియ నైపుణ్యంలో ఈ లక్ష్య పెరుగుదల అనుకరణ శాకాహారులకు ప్రతిస్పందనగా కేంద్ర కార్బన్ జీవక్రియ యొక్క పునర్నిర్మాణం వల్ల జరిగిందా అని పరిశోధించడానికి మేము అమైనో ఆమ్లాలు, సేంద్రీయ ఆమ్లాలు మరియు చక్కెరల (డేటా ఫైల్ S2) కంటెంట్‌ను లెక్కించాము (మూర్తి S2). ఈ నమూనాను బాగా వివరించడానికి, గతంలో చర్చించిన ఫినోలామైడ్ మరియు 17-HGL-DTG మార్గాల యొక్క జీవక్రియ సంచిత గతిశాస్త్రాలను మేము మరింత పర్యవేక్షించాము. శాకాహారుల యొక్క OS-నిర్దిష్ట ప్రేరణ ఫినోలామైడ్ జీవక్రియలో అవకలన పునర్వ్యవస్థీకరణ నమూనాగా రూపాంతరం చెందుతుంది (మూర్తి S3). కూమరిన్ మరియు కెఫియోయిల్ భాగాలను కలిగి ఉన్న ఫినాలిక్ అమైడ్‌లు OSS1 ద్వారా ప్రాధాన్యతగా ప్రేరేపించబడతాయి, అయితే OSMలు ఫెరులైల్ కంజుగేట్‌ల యొక్క నిర్దిష్ట ప్రేరణను ప్రేరేపిస్తాయి. 17-HGL-DTG మార్గం కోసం, డౌన్‌స్ట్రీమ్ మాలోనైలేషన్ మరియు డైమలోనైలేషన్ ఉత్పత్తుల ద్వారా అవకలన OS ప్రేరణ కనుగొనబడింది (మూర్తి S3).
తరువాత, మేము OS-ప్రేరిత ట్రాన్స్క్రిప్టోమ్ ప్లాస్టిసిటీని టైమ్-కోర్స్ మైక్రోఅరే డేటా సెట్ ఉపయోగించి అధ్యయనం చేసాము, ఇది శాకాహారులలోని రోసెట్ మొక్క ఆకుల ఆకులను చికిత్స చేయడానికి OSMల వినియోగాన్ని అనుకరిస్తుంది. నమూనా గతిశాస్త్రం ప్రాథమికంగా ఈ జీవక్రియ అధ్యయనంలో ఉపయోగించిన గతిశాస్త్రంతో అతివ్యాప్తి చెందుతుంది (35). కాలక్రమేణా జీవక్రియ ప్లాస్టిసిటీ ముఖ్యంగా పెరిగిన జీవక్రియ పునర్నిర్మాణంతో పోలిస్తే, Ms ద్వారా ప్రేరేపించబడిన ఆకులలో తాత్కాలిక ట్రాన్స్క్రిప్షన్ బరస్ట్‌లను మేము గమనించాము, ఇక్కడ ట్రాన్స్క్రిప్టోమ్ ఇండక్టిబిలిటీ (RDPI) మరియు స్పెషలైజేషన్ (δj) 1 వద్ద ఉన్నాయి. గంటల్లో గణనీయమైన పెరుగుదల ఉంది మరియు ఈ సమయంలో వైవిధ్యం (Hj), BMP1 యొక్క వ్యక్తీకరణ గణనీయంగా తగ్గింది, తరువాత ట్రాన్స్క్రిప్టోమ్ స్పెషలైజేషన్ సడలింపు (మూర్తి S4). పైన పేర్కొన్న ప్రారంభ హై-స్పెషలైజేషన్ మోడల్‌ను అనుసరించి, ప్రాథమిక జీవక్రియ నుండి పొందిన నిర్మాణ యూనిట్ల నుండి ప్రత్యేక జీవక్రియలను సమీకరించే ప్రక్రియలో జీవక్రియ జన్యు కుటుంబాలు (P450, గ్లైకోసైల్ట్రాన్స్‌ఫేరేస్ మరియు BAHD ఎసిల్ట్రాన్స్‌ఫేరేస్ వంటివి) పాల్గొంటాయి. కేస్ స్టడీగా, ఫెనిలాలనైన్ మార్గాన్ని విశ్లేషించారు. ఫినోలామైడ్ జీవక్రియలోని ప్రధాన జన్యువులు ఆకర్షణీయం కాని మొక్కలతో పోలిస్తే శాకాహార జంతువులలో అధిక OS-ప్రేరితంగా ఉన్నాయని మరియు వాటి వ్యక్తీకరణ నమూనాలలో దగ్గరగా సమలేఖనం చేయబడిందని విశ్లేషణ నిర్ధారించింది. ఈ మార్గం యొక్క అప్‌స్ట్రీమ్‌లో ట్రాన్స్‌క్రిప్షన్ కారకం MYB8 మరియు నిర్మాణాత్మక జన్యువులు PAL1, PAL2, C4H మరియు 4CL ట్రాన్స్‌క్రిప్షన్ యొక్క ప్రారంభ ప్రారంభాన్ని చూపించాయి. AT1, DH29 మరియు CV86 వంటి ఫినోలామైడ్ యొక్క తుది అసెంబ్లీలో పాత్ర పోషించే ఎసిల్‌ట్రాన్స్‌ఫేరేసెస్ దీర్ఘకాలిక అప్‌రెగ్యులేషన్ నమూనాను ప్రదర్శిస్తాయి (మూర్తి S4). పైన పేర్కొన్న పరిశీలనలు ట్రాన్స్‌క్రిప్టోమ్ స్పెషలైజేషన్ యొక్క ప్రారంభ ప్రారంభం మరియు జీవక్రియ స్పెషలైజేషన్ యొక్క తరువాత మెరుగుదల ఒక కపుల్డ్ మోడ్ అని సూచిస్తున్నాయి, ఇది శక్తివంతమైన రక్షణ ప్రతిస్పందనను ప్రారంభించే సింక్రోనస్ రెగ్యులేటరీ సిస్టమ్ వల్ల కావచ్చు.
మొక్కల హార్మోన్ సిగ్నలింగ్‌లోని పునర్నిర్మాణం మొక్కల శరీరధర్మ శాస్త్రాన్ని తిరిగి ప్రోగ్రామ్ చేయడానికి శాకాహార సమాచారాన్ని ఏకీకృతం చేసే నియంత్రణ పొరగా పనిచేస్తుంది. శాకాహార అనుకరణ తర్వాత, మేము కీలకమైన మొక్కల హార్మోన్ వర్గాల సంచిత డైనమిక్‌లను కొలిచాము మరియు వాటి మధ్య తాత్కాలిక సహ-వ్యక్తీకరణను దృశ్యమానం చేసాము [పియర్సన్ సహసంబంధ గుణకం (PCC)> 0.4] (మూర్తి 3A). ఊహించినట్లుగా, బయోసింథసిస్‌కు సంబంధించిన మొక్కల హార్మోన్లు మొక్కల హార్మోన్ సహ-వ్యక్తీకరణ నెట్‌వర్క్‌లో అనుసంధానించబడి ఉంటాయి. అదనంగా, వివిధ చికిత్సల ద్వారా ప్రేరేపించబడిన మొక్కల హార్మోన్లను హైలైట్ చేయడానికి జీవక్రియ విశిష్టత (Si సూచిక) ఈ నెట్‌వర్క్‌కు మ్యాప్ చేయబడింది. శాకాహార నిర్దిష్ట ప్రతిస్పందన యొక్క రెండు ప్రధాన ప్రాంతాలు డ్రా చేయబడ్డాయి: ఒకటి JA క్లస్టర్‌లో ఉంది, ఇక్కడ JA (దాని జీవశాస్త్రపరంగా క్రియాశీల రూపం JA-Ile) మరియు ఇతర JA ఉత్పన్నాలు అత్యధిక Si స్కోర్‌ను చూపుతాయి; మరొకటి ఇథిలీన్ (ET). గిబ్బరెల్లిన్ శాకాహార నిర్దిష్టతలో మితమైన పెరుగుదలను మాత్రమే చూపించగా, సైటోకినిన్, ఆక్సిన్ మరియు అబ్సిసిక్ ఆమ్లం వంటి ఇతర మొక్కల హార్మోన్లు శాకాహారులకు తక్కువ ప్రేరణ విశిష్టతను కలిగి ఉన్నాయి. W + W ని మాత్రమే ఉపయోగించడంతో పోలిస్తే, OS అప్లికేషన్ (W + OS) ద్వారా JA ఉత్పన్నాల గరిష్ట విలువ యొక్క విస్తరణను ప్రాథమికంగా JA ల యొక్క బలమైన నిర్దిష్ట సూచికగా మార్చవచ్చు. ఊహించని విధంగా, విభిన్న ఎలిసిటర్ కంటెంట్‌తో OSM మరియు OSS1 JA మరియు JA-Ile యొక్క సారూప్య సంచితానికి కారణమవుతాయని తెలిసింది. OSS1 కి విరుద్ధంగా, OSM ప్రత్యేకంగా మరియు బలంగా OSM లచే ప్రేరేపించబడుతుంది, అయితే OSS1 బేసల్ గాయాల ప్రతిస్పందనను విస్తరించదు (మూర్తి 3B).
(ఎ) శాకాహార-ప్రేరిత మొక్కల హార్మోన్ సంచిత గతిశాస్త్ర అనుకరణ యొక్క PCC గణన ఆధారంగా సహ-వ్యక్తీకరణ నెట్‌వర్క్ విశ్లేషణ. నోడ్ ఒకే మొక్క హార్మోన్‌ను సూచిస్తుంది మరియు నోడ్ యొక్క పరిమాణం చికిత్సల మధ్య మొక్కల హార్మోన్‌కు ప్రత్యేకమైన Si సూచికను సూచిస్తుంది. (బి) వివిధ రంగుల ద్వారా సూచించబడిన వివిధ చికిత్సల వల్ల ఆకులలో JA, JA-Ile మరియు ET చేరడం: నేరేడు పండు, W + OSM; నీలం, W + OSSl; నలుపు, W + W; బూడిద, C (నియంత్రణ). చికిత్స మరియు నియంత్రణ మధ్య గణనీయమైన తేడాలను ఆస్టరిస్క్‌లు సూచిస్తాయి (టూ-వే ANOVA తరువాత టుకే HSD పోస్ట్ హాక్ బహుళ పోలిక, *** P <0.001). JA బయోసింథసిస్‌లో (C)697 MS/MS (డేటా ఫైల్ S1) మరియు బలహీనమైన ET సిగ్నల్‌తో ETR1లో బలహీనమైన అవగాహన స్పెక్ట్రం (irAOC మరియు irCOI1) మరియు (D)585 MS/MS (డేటా ఫైల్ S1) యొక్క సమాచార సిద్ధాంత విశ్లేషణ రెండు అనుకరణ శాకాహారి చికిత్సలు మొక్కల పంక్తులు మరియు ఖాళీ వాహనం (EV) నియంత్రణ మొక్కలను ప్రేరేపించాయి. W+OS చికిత్స మరియు దెబ్బతినని నియంత్రణ మధ్య గణనీయమైన తేడాలను ఆస్టరిస్క్‌లు సూచిస్తాయి (టూ-వే ANOVA తరువాత టుకే HSD పోస్ట్ హాక్ బహుళ పోలిక, *P<0.05, **P<0.01 మరియు ***P<0.001). (E) స్పెషలైజేషన్‌కు చెల్లాచెదురుగా ఉన్న వ్యతిరేకత యొక్క చెల్లాచెదురుగా ఉన్న గ్రాఫ్‌లు. రంగులు వేర్వేరు జన్యుపరంగా మార్పు చెందిన జాతులను సూచిస్తాయి; చిహ్నాలు వేర్వేరు చికిత్సా పద్ధతులను సూచిస్తాయి: త్రిభుజం, W + OSS1; దీర్ఘచతురస్రం, W + OSM; వృత్తం C
తరువాత, శాకాహారులపై ఈ రెండు మొక్కల హార్మోన్ల జీవక్రియను విశ్లేషించడానికి JA మరియు ET బయోసింథసిస్ (irAOC మరియు irACO) మరియు అవగాహన (irCOI1 మరియు sETR1) యొక్క కీలక దశలలో మేము జన్యుపరంగా మార్పు చేయబడిన అటెన్యుయేటెడ్ నెపెంథెస్ (irCOI1 మరియు sETR1) జాతిని ఉపయోగిస్తాము. రీప్రోగ్రామింగ్ యొక్క సాపేక్ష సహకారం. మునుపటి ప్రయోగాలకు అనుగుణంగా, ఖాళీ క్యారియర్ (EV) మొక్కలలో శాకాహారి-OS యొక్క ప్రేరణను (మూర్తి 3, C నుండి D వరకు) మరియు OSM వల్ల కలిగే Hj సూచికలో మొత్తం తగ్గుదలను మేము నిర్ధారించాము, అయితే δj సూచిక పెరిగింది. OSS1 ద్వారా ప్రేరేపించబడిన ప్రతిస్పందన కంటే ప్రతిస్పందన మరింత స్పష్టంగా కనిపిస్తుంది. Hj మరియు δjలను కోఆర్డినేట్‌లుగా ఉపయోగించే రెండు-లైన్ గ్రాఫ్ నిర్దిష్ట సడలింపును చూపుతుంది (మూర్తి 3E). అత్యంత స్పష్టమైన ధోరణి ఏమిటంటే, JA సిగ్నల్ లేని జాతులలో, శాకాహారుల వల్ల కలిగే జీవక్రియ వైవిధ్యం మరియు ప్రత్యేక మార్పులు దాదాపు పూర్తిగా తొలగించబడతాయి (మూర్తి 3C). దీనికి విరుద్ధంగా, sETR1 మొక్కలలో నిశ్శబ్ద ET అవగాహన, శాకాహార జీవక్రియలో మార్పులపై మొత్తం ప్రభావం JA సిగ్నలింగ్ కంటే చాలా తక్కువగా ఉన్నప్పటికీ, OSM మరియు OSS1 ఉత్తేజనాల మధ్య Hj మరియు δj సూచికలలో వ్యత్యాసాన్ని తగ్గిస్తుంది (మూర్తి 3D మరియు చిత్రం S5). . ఇది JA సిగ్నల్ ట్రాన్స్‌డక్షన్ యొక్క ప్రధాన విధితో పాటు, ET సిగ్నల్ ట్రాన్స్‌డక్షన్ శాకాహారుల జాతుల-నిర్దిష్ట జీవక్రియ ప్రతిస్పందన యొక్క చక్కటి-ట్యూనింగ్‌గా కూడా పనిచేస్తుందని సూచిస్తుంది. ఈ చక్కటి-ట్యూనింగ్ ఫంక్షన్‌కు అనుగుణంగా, sETR1 మొక్కలలో మొత్తం జీవక్రియ ప్రేరేపణలో ఎటువంటి మార్పు లేదు. మరోవైపు, sETR1 మొక్కలతో పోలిస్తే, irACO మొక్కలు శాకాహారుల వల్ల కలిగే జీవక్రియ మార్పుల యొక్క సారూప్య మొత్తం వ్యాప్తిని ప్రేరేపించాయి, కానీ OSM మరియు OSS1 సవాళ్ల మధ్య గణనీయంగా భిన్నమైన Hj మరియు δj స్కోర్‌లను చూపించాయి (మూర్తి S5).
శాకాహారుల జాతుల-నిర్దిష్ట ప్రతిస్పందనకు ముఖ్యమైన సహకారాన్ని అందించే ప్రత్యేక జీవక్రియలను గుర్తించడానికి మరియు ET సిగ్నల్స్ ద్వారా వాటి ఉత్పత్తిని చక్కగా ట్యూన్ చేయడానికి, మేము గతంలో అభివృద్ధి చేసిన నిర్మాణాత్మక MS/MS పద్ధతిని ఉపయోగించాము. ఈ పద్ధతి MS/MS శకలాలు [సాధారణీకరించిన డాట్ ఉత్పత్తి (NDP)] మరియు తటస్థ నష్టం (NL) ఆధారంగా సారూప్యత స్కోరు నుండి జీవక్రియ కుటుంబాన్ని తిరిగి అంచనా వేయడానికి ద్వి-క్లస్టరింగ్ పద్ధతిపై ఆధారపడి ఉంటుంది. ET ట్రాన్స్‌జెనిక్ లైన్ల విశ్లేషణ ద్వారా నిర్మించబడిన MS/MS డేటా సెట్ 585 MS/MS (డేటా ఫైల్ S1) ను ఉత్పత్తి చేసింది, వీటిని ఏడు ప్రధాన MS/MS మాడ్యూల్స్ (M) (మూర్తి 4A) గా క్లస్టరింగ్ చేయడం ద్వారా పరిష్కరించబడింది. ఈ మాడ్యూళ్లలో కొన్ని గతంలో వర్గీకరించబడిన ప్రత్యేక జీవక్రియలతో దట్టంగా నిండి ఉన్నాయి: ఉదాహరణకు, M1, M2, M3, M4 మరియు M7 వివిధ ఫినాల్ ఉత్పన్నాలు (M1), ఫ్లేవనాయిడ్ గ్లైకోసైడ్‌లు (M2), ఎసిల్ చక్కెరలు (M3 మరియు M4) మరియు 17-HGL-DTG (M7) లలో సమృద్ధిగా ఉన్నాయి. అదనంగా, ప్రతి మాడ్యూల్‌లోని ఒకే మెటాబోలైట్ యొక్క జీవక్రియ నిర్దిష్ట సమాచారం (Si సూచిక) లెక్కించబడుతుంది మరియు దాని Si పంపిణీని అకారణంగా చూడవచ్చు. సంక్షిప్తంగా, అధిక శాకాహార మరియు జన్యురూప విశిష్టతను ప్రదర్శించే MS/MS స్పెక్ట్రా అధిక Si విలువలతో వర్గీకరించబడుతుంది మరియు కుర్టోసిస్ గణాంకాలు కుడి తోక మూలలో బొచ్చు పంపిణీని సూచిస్తాయి. అటువంటి లీన్ కొల్లాయిడ్ పంపిణీ M1లో కనుగొనబడింది, దీనిలో ఫినాల్ అమైడ్ అత్యధిక Si భిన్నాన్ని చూపించింది (మూర్తి 4B). M7లో గతంలో పేర్కొన్న శాకాహార ప్రేరేపిత 17-HGL-DTG మితమైన Si స్కోర్‌ను చూపించింది, ఇది రెండు OS రకాల మధ్య మితమైన స్థాయి అవకలన నియంత్రణను సూచిస్తుంది. దీనికి విరుద్ధంగా, రూటిన్, CGA మరియు ఎసిల్ చక్కెరలు వంటి చాలా నిర్మాణాత్మకంగా ఉత్పత్తి చేయబడిన ప్రత్యేక జీవక్రియలు అత్యల్ప Si స్కోర్‌లలో ఉన్నాయి. ప్రత్యేక జీవక్రియల మధ్య నిర్మాణ సంక్లిష్టత మరియు Si పంపిణీని బాగా అన్వేషించడానికి, ప్రతి మాడ్యూల్ కోసం ఒక పరమాణు నెట్‌వర్క్ నిర్మించబడింది (మూర్తి 4B). OD సిద్ధాంతం యొక్క ముఖ్యమైన అంచనా (చిత్రం 1B లో సంగ్రహించబడింది) ఏమిటంటే, శాకాహారం తర్వాత ప్రత్యేక జీవక్రియల పునర్వ్యవస్థీకరణ అధిక రక్షణ విలువ కలిగిన జీవక్రియలలో వన్-వే మార్పులకు దారితీయాలి, ముఖ్యంగా వాటి విశిష్టతను పెంచడం ద్వారా (యాదృచ్ఛిక పంపిణీకి విరుద్ధంగా) మోడ్) MT సిద్ధాంతం ద్వారా అంచనా వేయబడిన రక్షణాత్మక జీవక్రియ. M1 లో పేరుకుపోయిన చాలా ఫినాల్ ఉత్పన్నాలు కీటకాల పనితీరు క్షీణతకు క్రియాత్మకంగా సంబంధించినవి (32). ప్రేరేపిత ఆకులు మరియు EV నియంత్రణ మొక్కల యొక్క రాజ్యాంగ ఆకుల మధ్య M1 జీవక్రియలలోని Si విలువలను 24 గంటల్లో పోల్చినప్పుడు, శాకాహార కీటకాల తర్వాత అనేక జీవక్రియల జీవక్రియ విశిష్టత గణనీయమైన పెరుగుదల ధోరణిని కలిగి ఉందని మేము గమనించాము (చిత్రం 4C). Si విలువలో నిర్దిష్ట పెరుగుదల రక్షణాత్మక ఫినోలామైడ్‌లలో మాత్రమే కనుగొనబడింది, కానీ ఈ మాడ్యూల్‌లో సహజీవనం చేసే ఇతర ఫినాల్‌లు మరియు తెలియని జీవక్రియలలో Si విలువలో పెరుగుదల కనుగొనబడలేదు. ఇది OD సిద్ధాంతానికి సంబంధించిన ప్రత్యేక నమూనా. శాకాహారుల వల్ల కలిగే జీవక్రియ మార్పుల యొక్క ప్రధాన అంచనాలు స్థిరంగా ఉంటాయి. ఫినోలామైడ్ స్పెక్ట్రం యొక్క ఈ ప్రత్యేకత OS-నిర్దిష్ట ET ద్వారా ప్రేరేపించబడిందో లేదో పరీక్షించడానికి, మేము మెటాబోలైట్ Si సూచికను ప్లాట్ చేసాము మరియు EV మరియు sETR1 జన్యురూపాలలో OSM మరియు OSS1 మధ్య అవకలన వ్యక్తీకరణ విలువను కలిగించాము (మూర్తి 4D). sETR1లో, OSM మరియు OSS1 మధ్య ఫినామైడ్-ప్రేరిత వ్యత్యాసం బాగా తగ్గింది. JA-నియంత్రిత జీవక్రియ స్పెషలైజేషన్ (మూర్తి S6) కు సంబంధించిన ప్రధాన MS/MS మాడ్యూల్‌లను ఊహించడానికి తగినంత JA లేని జాతులలో సేకరించిన MS/MS డేటాకు కూడా బై-క్లస్టరింగ్ పద్ధతిని వర్తింపజేసారు.
(ఎ) షేర్డ్ ఫ్రాగ్మెంట్ (ఎన్‌డిపి సారూప్యత) మరియు షేర్డ్ న్యూట్రల్ లాస్ (ఎన్‌ఎల్ సారూప్యత) ఆధారంగా 585 MS/MS యొక్క క్లస్టరింగ్ ఫలితాలు మాడ్యూల్ (M) తెలిసిన సమ్మేళన కుటుంబానికి అనుగుణంగా ఉండటం లేదా తెలియని లేదా పేలవంగా జీవక్రియ చేయబడిన మెటాబోలైట్ కూర్పు ద్వారా స్థిరంగా ఉండటంలో ఫలితమిస్తాయి. ప్రతి మాడ్యూల్ పక్కన, మెటాబోలైట్ (MS/MS) నిర్దిష్ట (Si) పంపిణీ చూపబడింది. (బి) మాడ్యులర్ మాలిక్యులర్ నెట్‌వర్క్: నోడ్‌లు MS/MS మరియు అంచులను సూచిస్తాయి, NDP (ఎరుపు) మరియు NL (నీలం) MS/MS స్కోర్‌లు (కట్-ఆఫ్,> 0.6). గ్రేడెడ్ మెటాబోలైట్ స్పెసిసిటీ ఇండెక్స్ (Si) మాడ్యూల్ (ఎడమ) ఆధారంగా రంగు వేయబడింది మరియు మాలిక్యులర్ నెట్‌వర్క్ (కుడి)కి మ్యాప్ చేయబడింది. (సి) 24 గంటల్లో కాన్‌స్టిట్యూటివ్ (నియంత్రణ) మరియు ప్రేరిత స్థితిలో (అనుకరణ శాకాహారి) EV ప్లాంట్ యొక్క మాడ్యూల్ M1: మాలిక్యులర్ నెట్‌వర్క్ రేఖాచిత్రం (Si విలువ నోడ్ పరిమాణం, రక్షణాత్మక ఫినోలామైడ్ నీలం రంగులో హైలైట్ చేయబడింది). (D) బలహీనమైన EV మరియు ET అవగాహనతో స్పెక్ట్రమ్ లైన్ sETR1 యొక్క M1 మాలిక్యులర్ నెట్‌వర్క్ రేఖాచిత్రం: గ్రీన్ సర్కిల్ నోడ్ ద్వారా సూచించబడే ఫినోలిక్ సమ్మేళనం మరియు నోడ్ పరిమాణంగా W + OSM మరియు W + OSS1 చికిత్సల మధ్య గణనీయమైన వ్యత్యాసం (P విలువ). CP, N-కాఫియోల్-టైరోసిన్; CS, N-కాఫియోల్-స్పెర్మిడిన్; FP, N-ఫెరులిక్ యాసిడ్ ఈస్టర్-యూరిక్ యాసిడ్; FS, N-ఫెరులైల్-స్పెర్మిడిన్; CoP, N', N “-కౌమరోలైల్-టైరోసిన్; DCS, N', N”-డికాఫియోల్-స్పెర్మిడిన్; CFS, N', N”-కాఫియోల్, ఫెరులోయిల్-స్పెర్మిడిన్; వోల్ఫ్‌బెర్రీ సన్‌లో లైసియం బార్బరం; నిక్. O-AS, O-ఎసిల్ షుగర్.
మేము విశ్లేషణను ఒకే అటెన్యుయేటెడ్ నెపెంథెస్ జన్యురూపం నుండి సహజ జనాభాకు విస్తరించాము, ఇక్కడ శాకాహారుల వల్ల కలిగే JA స్థాయిలు మరియు నిర్దిష్ట జీవక్రియ స్థాయిలలో బలమైన అంతర్-నిర్దిష్ట మార్పులు గతంలో సహజ జనాభాలో వివరించబడ్డాయి (26). 43 జెర్మ్‌ప్లాజమ్‌లను కవర్ చేయడానికి ఈ డేటా సెట్‌ను ఉపయోగించండి. ఈ జెర్మ్‌ప్లాజమ్‌లు N. పల్లెన్‌ల నుండి 123 జాతుల మొక్కలను కలిగి ఉంటాయి. ఈ మొక్కలను ఉతా, నెవాడా, అరిజోనా మరియు కాలిఫోర్నియాలోని వివిధ స్థానిక ఆవాసాలలో సేకరించిన విత్తనాల నుండి తీసుకున్నారు (మూర్తి S7), మేము జీవక్రియ వైవిధ్యాన్ని (ఇక్కడ జనాభా స్థాయి అని పిలుస్తారు) β వైవిధ్యం) మరియు OSM వల్ల కలిగే ప్రత్యేకతను లెక్కించాము. మునుపటి అధ్యయనాలకు అనుగుణంగా, మేము Hj మరియు δj అక్షాల వెంట విస్తృత శ్రేణి జీవక్రియ మార్పులను గమనించాము, ఇది జెర్మ్‌ప్లాజమ్‌లు శాకాహారులకు వాటి జీవక్రియ ప్రతిస్పందనల ప్లాస్టిసిటీలో గణనీయమైన తేడాలను కలిగి ఉన్నాయని సూచిస్తుంది (మూర్తి S7). ఈ సంస్థ శాకాహారుల వల్ల కలిగే JAs మార్పుల యొక్క డైనమిక్ పరిధి గురించి మునుపటి పరిశీలనలను గుర్తుకు తెస్తుంది మరియు ఒకే జనాభాలో చాలా ఎక్కువ విలువను కలిగి ఉంది (26, 36). Hj మరియు δj మధ్య మొత్తం స్థాయి సహసంబంధాన్ని పరీక్షించడానికి JA మరియు JA-Ile లను ఉపయోగించడం ద్వారా, JA మరియు జీవక్రియ β వైవిధ్యం మరియు ప్రత్యేక సూచిక మధ్య గణనీయమైన సానుకూల సహసంబంధం ఉందని మేము కనుగొన్నాము (మూర్తి S7). జనాభా స్థాయిలో కనుగొనబడిన JA ల ప్రేరణలో శాకాహారి-ప్రేరిత వైవిధ్యత కీటకాల శాకాహారుల నుండి ఎంపిక వల్ల కలిగే కీలక జీవక్రియ పాలిమార్ఫిజమ్‌ల వల్ల కావచ్చునని ఇది సూచిస్తుంది.
మునుపటి అధ్యయనాలు పొగాకు రకాలు ప్రేరేపిత మరియు నిర్మాణాత్మక జీవక్రియ రక్షణలపై రకం మరియు సాపేక్ష ఆధారపడటంలో చాలా భిన్నంగా ఉన్నాయని చూపించాయి. యాంటీ-హెర్బివోర్ సిగ్నల్ ట్రాన్స్‌డక్షన్ మరియు రక్షణ సామర్థ్యాలలో ఈ మార్పులు ఇచ్చిన జాతి పెరిగే ప్రదేశంలో కీటకాల జనాభా ఒత్తిడి, మొక్కల జీవిత చక్రం మరియు రక్షణ ఉత్పత్తి ఖర్చుల ద్వారా నియంత్రించబడతాయని నమ్ముతారు. ఉత్తర అమెరికా మరియు దక్షిణ అమెరికాకు చెందిన ఆరు నికోటియానా జాతుల శాకాహారులచే ప్రేరేపించబడిన ఆకు జీవక్రియ పునర్నిర్మాణం యొక్క స్థిరత్వాన్ని మేము అధ్యయనం చేసాము. ఈ జాతులు నెపెంథెస్ ఉత్తర అమెరికాకు దగ్గరి సంబంధం కలిగి ఉన్నాయి, అవి నికోలస్ బోసిఫ్లో. లా, ఎన్. నికోటినిస్, నికోటియానా ఎన్. అటెన్యూయేటెడ్ గడ్డి, నికోటియానా టాబాకమ్, లీనియర్ పొగాకు, పొగాకు (నికోటియానా స్పెగాజిని) మరియు పొగాకు ఆకు పొగాకు (నికోటియానా ఓబ్టుసిఫోలియా) (మూర్తి 5A) (37). ఈ జాతులలో ఆరు, బాగా వర్గీకరించబడిన జాతులు N. దయచేసి, పెటునియా క్లాడ్ యొక్క వార్షిక మొక్కలు మరియు ఆబ్టుసిఫోలియా N. సోదరి క్లాడ్ ట్రైగోనోఫిలే యొక్క శాశ్వత మొక్కలు (38). తదనంతరం, కీటకాల ఆహారం యొక్క జాతుల-స్థాయి జీవక్రియ పునర్వ్యవస్థీకరణను అధ్యయనం చేయడానికి ఈ ఏడు జాతులపై W + W, W + OSM మరియు W + OSS1 ప్రేరణలను నిర్వహించారు.
(ఎ) [న్యూక్లియర్ గ్లుటామైన్ సంశ్లేషణ (38) కోసం] మరియు ఏడు దగ్గరి సంబంధం ఉన్న నికోటియానా జాతుల భౌగోళిక పంపిణీ (విభిన్న రంగులు) ఆధారంగా బూట్‌స్ట్రాప్ ఫైలోజెనెటిక్ చెట్టు (37). (బి) ఏడు నికోటియానా జాతుల జీవక్రియ ప్రొఫైల్‌ల కోసం ప్రత్యేక వైవిధ్యం యొక్క స్కాటర్ ప్లాట్ (939 MS/MS; డేటా ఫైల్ S1). జాతుల స్థాయిలో, జీవక్రియ వైవిధ్యం స్పెషలైజేషన్ డిగ్రీతో ప్రతికూలంగా సహసంబంధం కలిగి ఉంటుంది. జీవక్రియ వైవిధ్యం మరియు స్పెషలైజేషన్ మరియు JA సంచితం మధ్య జాతుల-స్థాయి సహసంబంధం యొక్క విశ్లేషణ చిత్రం 2లో చూపబడింది. S9. రంగు, వివిధ రకాలు; త్రిభుజం, W + OSS1; దీర్ఘచతురస్రం, W + OSM; (సి) నికోటియానా JA మరియు JA-Ile డైనమిక్స్ OS ఉత్తేజిత వ్యాప్తి ప్రకారం ర్యాంక్ చేయబడ్డాయి (రెండు-మార్గం ANOVA మరియు టుకే HSD పోస్ట్-మల్టిపుల్ పోలిక, * P <0.05, ** P <0.01 మరియు * ** W + OS మరియు W + W, P <0.001 పోలిక కోసం). శాకాహార మరియు మిథైల్ JA (MeJA) అనుకరణ తర్వాత ప్రతి జాతి యొక్క (D) వైవిధ్యం మరియు (E) ప్రత్యేకత యొక్క బాక్స్ ప్లాట్. నక్షత్రం W + OS మరియు W + W లేదా లానోలిన్ ప్లస్ W (Lan + W) లేదా లాన్ ప్లస్ MeJA (Lan + MeJa) మరియు లాన్ నియంత్రణ (వైవిధ్యం యొక్క రెండు-మార్గ విశ్లేషణ, తరువాత టుకే యొక్క HSD పోస్ట్ హాక్ బహుళ పోలిక, *P<0.05, **P<0.01 మరియు ***P<0.001) మధ్య గణనీయమైన వ్యత్యాసాన్ని సూచిస్తుంది.
డ్యూయల్ క్లస్టర్ పద్ధతిని ఉపయోగించి, మేము 939 MS/MS యొక్క 9 మాడ్యూల్‌లను గుర్తించాము (డేటా ఫైల్ S1). వివిధ చికిత్సల ద్వారా పునర్నిర్మించబడిన MS/MS యొక్క కూర్పు జాతుల మధ్య వివిధ మాడ్యూల్‌లలో చాలా తేడా ఉంటుంది (మూర్తి S8). Hj (ఇక్కడ జాతుల-స్థాయి γ-వైవిధ్యం అని పిలుస్తారు) మరియు δj లను దృశ్యమానం చేయడం వలన వివిధ జాతులు జీవక్రియ స్థలంలో చాలా భిన్నమైన సమూహాలుగా కలిసిపోతాయని తెలుస్తుంది, ఇక్కడ జాతుల-స్థాయి విభజన సాధారణంగా ఉత్తేజితం కంటే ప్రముఖంగా ఉంటుంది. N. లీనియర్ మరియు N. ఆబ్లిక్వస్ మినహా, అవి విస్తృత డైనమిక్ శ్రేణి ఇండక్షన్ ప్రభావాలను ప్రదర్శిస్తాయి (మూర్తి 5B). దీనికి విరుద్ధంగా, N. పర్పురియా మరియు N. ఆబ్టుసిఫోలియా వంటి జాతులు చికిత్సకు తక్కువ స్పష్టమైన జీవక్రియ ప్రతిస్పందనను కలిగి ఉంటాయి, కానీ జీవక్రియ మరింత వైవిధ్యంగా ఉంటుంది. ప్రేరేపిత జీవక్రియ ప్రతిస్పందన యొక్క జాతుల-నిర్దిష్ట పంపిణీ ప్రత్యేకత మరియు గామా వైవిధ్యం మధ్య గణనీయమైన ప్రతికూల సహసంబంధానికి దారితీసింది (PCC = -0.46, P = 4.9×10-8). JA ల స్థాయిలలో OS-ప్రేరిత మార్పులు జీవక్రియ ప్రత్యేకతతో సానుకూలంగా సంబంధం కలిగి ఉంటాయి మరియు ప్రతి జాతి ప్రదర్శించే జీవక్రియ గామా వైవిధ్యంతో ప్రతికూలంగా సంబంధం కలిగి ఉంటాయి (మూర్తి 5B మరియు చిత్రం S9). నెపెంథెస్ నెమటోడ్‌లు, నెపెంథెస్ నెపెంథెస్, నెపెంథెస్ అక్యూట్ మరియు నెపెంథెస్ అటెన్యుయేటెడ్ వంటి "సిగ్నల్ రెస్పాన్స్" జాతులుగా Figure 5C లో వ్యావహారికంగా సూచించబడే జాతులు 30 నిమిషాలలో గణనీయమైన సంకేతాలను కలిగించాయని గమనించాలి. ఇటీవలి OS-నిర్దిష్ట JA మరియు JA-Ile వ్యాప్తి, అయితే "సిగ్నల్ అన్‌రెస్పాన్సివ్" అని పిలువబడే ఇతర బ్యాక్టీరియా, నెపెంథెస్ మిల్స్, నెపెంథెస్ పౌడరీ మరియు N. obtusifolia వంటివి ఏ OS ప్రత్యేకత లేకుండా JA-Ile ఎడ్జ్ ఇండక్షన్‌ను మాత్రమే చూపుతాయి (మూర్తి 5C). పైన పేర్కొన్నట్లుగా, అటెన్యుయేటెడ్ నెపెంథెస్ కోసం, సిగ్నల్-ప్రతిస్పందించే పదార్థాలు OS ప్రత్యేకతను చూపించాయి మరియు Hj ను తగ్గిస్తూ δj ను గణనీయంగా పెంచాయి. సిగ్నల్ నాన్-రియాక్టివ్ జాతులుగా వర్గీకరించబడిన జాతులలో ఈ OS-నిర్దిష్ట ప్రైమింగ్ ప్రభావం కనుగొనబడలేదు (మూర్తి 5, D మరియు E). సిగ్నల్-ప్రతిస్పందించే జాతుల మధ్య OS-నిర్దిష్ట జీవక్రియలు ఎక్కువగా పంచుకోబడతాయి మరియు ఈ సిగ్నల్ క్లస్టర్లు బలహీనమైన సిగ్నల్ ప్రతిస్పందనలు కలిగిన జాతులతో సమూహంగా ఉంటాయి, అయితే బలహీనమైన సిగ్నల్ ప్రతిస్పందనలు కలిగిన జాతులు తక్కువ పరస్పర ఆధారపడటాన్ని చూపుతాయి (మూర్తి S8). ఈ ఫలితం JA ల యొక్క OS-నిర్దిష్ట ప్రేరణ మరియు దిగువ జీవక్రియ యొక్క OS-నిర్దిష్ట పునర్నిర్మాణం జాతుల స్థాయిలో జతచేయబడిందని సూచిస్తుంది.
తరువాత, మొక్కల సైటోప్లాజంలో ఉండే బాహ్య JA ద్వారా వర్తించే JA లభ్యత ద్వారా ఈ కప్లింగ్ మోడ్‌లు పరిమితం చేయబడ్డాయో లేదో పరిశోధించడానికి, మొక్కలకు చికిత్స చేయడానికి మేము మిథైల్ JA (MeJA) కలిగిన లానోలిన్ పేస్ట్‌ను ఉపయోగించాము. వేగవంతమైన డీస్టెరిఫికేషన్ అనేది JA. JA యొక్క నిరంతర సరఫరా వల్ల సిగ్నల్-రెస్పాన్సివ్ జాతుల నుండి సిగ్నల్-నాన్-రెస్పాన్సివ్ జాతులకు క్రమంగా మార్పు యొక్క అదే ధోరణిని మేము కనుగొన్నాము (మూర్తి 5, D మరియు E). సంక్షిప్తంగా, MeJA చికిత్స లీనియర్ నెమటోడ్‌లు, N. ఆబ్లిక్వస్, N. ఆక్వాటికస్, N. పల్లెన్స్ మరియు N. మికిమోటోయి యొక్క జీవక్రియలను బలంగా పునఃప్రారంభించింది, దీని ఫలితంగా δjలో గణనీయమైన పెరుగుదల మరియు Hjలో తగ్గుదల ఏర్పడింది. N. పర్పురియా δjలో పెరుగుదలను మాత్రమే చూపించింది, కానీ గతంలో చాలా తక్కువ స్థాయిలో JAలు పేరుకుపోతాయని చూపబడిన Hj. N. ఆబ్టుసిఫోలియా కూడా జీవక్రియ పునర్నిర్మాణం పరంగా MeJA చికిత్సకు పేలవంగా స్పందిస్తుంది. ఈ ఫలితాలు సిగ్నల్-ప్రతిస్పందించని జాతులలో JA ఉత్పత్తి లేదా సిగ్నల్ ట్రాన్స్‌డక్షన్ శారీరకంగా పరిమితం చేయబడిందని సూచిస్తున్నాయి. ఈ పరికల్పనను పరీక్షించడానికి, W + W, W + OSMలు మరియు W + OSS1 ట్రాన్స్‌క్రిప్టోమ్ (39) ద్వారా ప్రేరేపించబడిన నాలుగు జాతులను (N. pallens, N. mills, N. pink మరియు N. microphylla) అధ్యయనం చేసాము. జీవక్రియ పునర్నిర్మాణం యొక్క నమూనాకు అనుగుణంగా, జాతులు ట్రాన్స్‌క్రిప్టోమ్ స్థలంలో బాగా వేరు చేయబడ్డాయి, వీటిలో N. attenuated అత్యధిక OS-ప్రేరిత RDPIని చూపించింది, అయితే N. gracilis అత్యల్పంగా ఉంది (మూర్తి 6A). అయితే, N. oblonga ద్వారా ప్రేరేపించబడిన ట్రాన్స్‌క్రిప్టోమ్ వైవిధ్యం నాలుగు జాతులలో అత్యల్పంగా ఉందని కనుగొనబడింది, గతంలో ఏడు జాతులలో చూపబడిన N. oblonga యొక్క అత్యధిక జీవక్రియ వైవిధ్యానికి విరుద్ధంగా. JA సిగ్నల్‌లతో సహా ప్రారంభ రక్షణ సంకేతాలకు సంబంధించిన జన్యువుల సమితి, నికోటియానా జాతులలో శాకాహారి-సంబంధిత ఎలిసిటర్‌ల ద్వారా ప్రేరేపించబడిన ప్రారంభ రక్షణ ప్రతిస్పందనల విశిష్టతను వివరిస్తుందని మునుపటి అధ్యయనాలు చూపించాయి (39). ఈ నాలుగు జాతుల మధ్య JA సిగ్నలింగ్ మార్గాలను పోల్చడం వలన ఆసక్తికరమైన నమూనా వెల్లడైంది (మూర్తి 6B). ఈ మార్గంలోని చాలా జన్యువులు, AOC, OPR3, ACX మరియు COI1 వంటివి, ఈ నాలుగు జాతులలో సాపేక్షంగా అధిక స్థాయిలో ప్రేరణను చూపించాయి. అయితే, JAR4 అనే కీలకమైన జన్యువు, JAని దాని జీవశాస్త్రపరంగా చురుకైన JA-Ile సంచిత ట్రాన్స్‌క్రిప్ట్‌ల రూపంలోకి మారుస్తుంది మరియు దాని ట్రాన్స్‌క్రిప్షన్ స్థాయి చాలా తక్కువగా ఉంటుంది, ముఖ్యంగా N. మిల్స్, నెపెంథెస్ పియరిస్ మరియు N. మైక్రోఫిల్లాలో. అదనంగా, N. బిఫిడమ్‌లో మరొక జన్యువు AOS యొక్క ట్రాన్స్‌క్రిప్ట్ మాత్రమే కనుగొనబడలేదు. జన్యు వ్యక్తీకరణలో ఈ మార్పులు సిగ్నల్ అనెర్జిక్ జాతులలో తక్కువ JA ఉత్పత్తి మరియు N. గ్రాసిలిస్ యొక్క ప్రేరణ ద్వారా ప్రేరేపించబడిన తీవ్ర సమలక్షణాలకు కారణం కావచ్చు.
(ఎ) శాకాహార ప్రేరణ తర్వాత 30 నిమిషాల తర్వాత నమూనా చేయబడిన నాలుగు దగ్గరి సంబంధం ఉన్న పొగాకు జాతుల ప్రారంభ ట్రాన్స్క్రిప్షనల్ ప్రతిస్పందనల రీప్రోగ్రామింగ్ యొక్క సమాచార సిద్ధాంత విశ్లేషణ. శాకాహారి OS ద్వారా ప్రేరేపించబడిన ఆకులను గాయం నియంత్రణతో పోల్చడం ద్వారా RDPI లెక్కించబడుతుంది. రంగులు వేర్వేరు జాతులను సూచిస్తాయి మరియు చిహ్నాలు వేర్వేరు చికిత్సా పద్ధతులను సూచిస్తాయి. (బి) నాలుగు జాతులలో JA సిగ్నలింగ్ మార్గాల్లో జన్యు వ్యక్తీకరణ యొక్క విశ్లేషణ. సరళీకృత JA మార్గం బాక్స్ ప్లాట్ పక్కన చూపబడింది. వేర్వేరు రంగులు వేర్వేరు ప్రాసెసింగ్ పద్ధతులను సూచిస్తాయి. W + OS చికిత్స మరియు W + W నియంత్రణ మధ్య గణనీయమైన వ్యత్యాసం ఉందని నక్షత్రం సూచిస్తుంది (జతవారీ తేడాల కోసం విద్యార్థుల t-పరీక్ష కోసం, *P<0.05, **P<0.01 మరియు ***P<0.001). OPDA, 12-ఆక్సోఫైటోడియెనోయిక్ ఆమ్లం; OPC-8: 0,3-ఆక్సో-2(2′(Z)-పెంటెనిల్)-సైక్లోపెంటనే-1-ఆక్టానోయిక్ ఆమ్లం.
చివరి భాగంలో, వివిధ వృక్ష జాతుల జీవక్రియ యొక్క కీటక జాతుల-నిర్దిష్ట పునర్నిర్మాణం శాకాహారులకు ఎలా నిరోధకతను కలిగి ఉంటుందో మేము అధ్యయనం చేసాము. మునుపటి పరిశోధన నికోటియానా జాతిని నొక్కి చెప్పింది. Ms మరియు లార్వాలకు వాటి నిరోధకత చాలా భిన్నంగా ఉంటుంది (40). ఇక్కడ, ఈ నమూనా మరియు వాటి జీవక్రియ ప్లాస్టిసిటీ మధ్య సంబంధాన్ని మేము అధ్యయనం చేసాము. పైన పేర్కొన్న నాలుగు పొగాకు జాతులను ఉపయోగించి, మరియు శాకాహారుల వల్ల కలిగే జీవక్రియ యొక్క వైవిధ్యం మరియు ప్రత్యేకత మరియు Ms మరియు Sl లకు మొక్కల నిరోధకత మధ్య సహసంబంధాన్ని పరీక్షించినప్పుడు, సాధారణ Sl కు నిరోధకత, వైవిధ్యం మరియు ప్రత్యేకత సానుకూలంగా సంబంధం కలిగి ఉన్నాయని మేము కనుగొన్నాము, అయితే నిపుణులైన మహిళలకు నిరోధకత మరియు ప్రత్యేకత మధ్య సహసంబంధం బలహీనంగా ఉంది మరియు వైవిధ్యంతో సహసంబంధం ముఖ్యమైనది కాదు (చిత్రం S10). S1 నిరోధకతకు సంబంధించి, గతంలో JA సిగ్నల్ ట్రాన్స్‌డక్షన్ స్థాయిలు మరియు జీవక్రియ ప్లాస్టిసిటీ రెండింటినీ ప్రదర్శించడానికి చూపబడిన అటెన్యూయేటెడ్ N. చినెన్సిస్ మరియు N. గ్రాసిలిస్ రెండూ శాకాహార ప్రేరణకు చాలా భిన్నమైన ప్రతిస్పందనలను కలిగి ఉన్నాయి మరియు అవి కూడా ఇలాంటి అధిక నిరోధకతను చూపించాయి. సెక్స్.
గత అరవై సంవత్సరాలలో, మొక్కల రక్షణ సిద్ధాంతం ఒక సైద్ధాంతిక చట్రాన్ని అందించింది, దీని ఆధారంగా పరిశోధకులు మొక్కల ప్రత్యేక జీవక్రియల పరిణామం మరియు విధులను గణనీయమైన సంఖ్యలో అంచనా వేశారు. ఈ సిద్ధాంతాలలో ఎక్కువ భాగం బలమైన అనుమానాల సాధారణ విధానాన్ని అనుసరించవు (41). అవి అదే స్థాయిలో విశ్లేషణలో కీలక అంచనాలను (3) ప్రతిపాదిస్తాయి. కీలక అంచనాల పరీక్ష నిర్దిష్ట సిద్ధాంతాలను విశ్లేషించడానికి అనుమతించినప్పుడు, ఇది చేస్తుంది ది ఫీల్డ్ ముందుకు సాగుతోంది. మద్దతు పొందండి, కానీ ఇతరులను తిరస్కరించండి (42). బదులుగా, కొత్త సిద్ధాంతం వివిధ స్థాయిల విశ్లేషణలలో అంచనాలను వేస్తుంది మరియు వివరణాత్మక పరిగణనల యొక్క కొత్త పొరను జోడిస్తుంది (42). అయితే, క్రియాత్మక స్థాయిలో ప్రతిపాదించబడిన రెండు సిద్ధాంతాలు, MT మరియు OD, శాకాహారుల వల్ల కలిగే ప్రత్యేక జీవక్రియ మార్పుల యొక్క ముఖ్యమైన అంచనాలుగా సులభంగా వివరించవచ్చు: OD సిద్ధాంతం ప్రత్యేకమైన జీవక్రియ "స్థలం"లో మార్పులు అత్యంత దిశాత్మకమైనవని నమ్ముతుంది. MT సిద్ధాంతం ఈ మార్పులు దిశాత్మకం కానివి మరియు యాదృచ్ఛికంగా జీవక్రియ ప్రదేశంలో ఉంటాయని మరియు అధిక రక్షణ విలువ జీవక్రియలను కలిగి ఉంటాయని నమ్ముతుంది. OD మరియు MT అంచనాల మునుపటి పరీక్షలు ప్రియోరి "రక్షణ" సమ్మేళనాల ఇరుకైన సమితిని ఉపయోగించి పరీక్షించబడ్డాయి. ఈ మెటాబోలైట్-కేంద్రీకృత పరీక్షలు శాకాహార సమయంలో జీవక్రియ పునర్నిర్మాణం యొక్క పరిధి మరియు పథాన్ని విశ్లేషించే సామర్థ్యాన్ని నిరోధిస్తాయి మరియు స్థిరమైన గణాంక చట్రంలో పరీక్షను అనుమతించవు, వీటిని మొత్తంగా పరిగణించగల కీలక అంచనాలు అవసరం. మొక్కల జీవక్రియలో మార్పులను లెక్కించండి. ఇక్కడ, మేము కంప్యూటేషనల్ MS ఆధారంగా జీవక్రియలో వినూత్న సాంకేతికతను ఉపయోగించాము మరియు ప్రపంచ జీవక్రియ స్థాయిలో ప్రతిపాదించబడిన రెండింటి మధ్య వ్యత్యాసాన్ని పరీక్షించడానికి సమాచార సిద్ధాంత వివరణల సాధారణ కరెన్సీలో డీకన్వల్యూషన్ MS విశ్లేషణను నిర్వహించాము. ఈ సిద్ధాంతం యొక్క కీలక అంచనా. సమాచార సిద్ధాంతం అనేక రంగాలలో, ముఖ్యంగా జీవవైవిధ్యం మరియు పోషక ప్రవాహ పరిశోధన సందర్భంలో వర్తింపజేయబడింది (43). అయితే, మనకు తెలిసినంతవరకు, మొక్కల జీవక్రియ సమాచార స్థలాన్ని వివరించడానికి మరియు పర్యావరణ సూచనలకు ప్రతిస్పందనగా తాత్కాలిక జీవక్రియ మార్పులకు సంబంధించిన పర్యావరణ సమస్యలను పరిష్కరించడానికి ఉపయోగించే మొదటి అప్లికేషన్ ఇది. ముఖ్యంగా, ఈ పద్ధతి యొక్క సామర్థ్యం మొక్కల జాతుల లోపల మరియు వాటి మధ్య నమూనాలను పోల్చగల సామర్థ్యంలో ఉంది, ఇది వివిధ స్థాయిల పరిణామంలో శాకాహారులు వివిధ జాతుల నుండి అంతర్-జాతుల స్థూల పరిణామ నమూనాలకు ఎలా పరిణామం చెందారో పరిశీలించడానికి. జీవక్రియ.
ప్రిన్సిపల్ కాంపోనెంట్ అనాలిసిస్ (PCA) ఒక మల్టీవేరియేట్ డేటా సెట్‌ను డైమెన్షనల్ రిడక్షన్ స్పేస్‌గా మారుస్తుంది, తద్వారా డేటా యొక్క ప్రధాన ట్రెండ్‌ను వివరించవచ్చు, కాబట్టి దీనిని సాధారణంగా డీకన్వల్యూషన్ మెటబోలోమ్ వంటి డేటా సెట్‌ను అన్వయించడానికి అన్వేషణాత్మక సాంకేతికతగా ఉపయోగిస్తారు. అయితే, డైమెన్షనల్ రిడక్షన్ డేటా సెట్‌లోని సమాచార కంటెంట్‌లో కొంత భాగాన్ని కోల్పోతుంది మరియు PCA పర్యావరణ సిద్ధాంతానికి ప్రత్యేకంగా సంబంధించిన లక్షణాల గురించి పరిమాణాత్మక సమాచారాన్ని అందించదు, అవి: శాకాహారులు ప్రత్యేక రంగాలలో వైవిధ్యాన్ని ఎలా పునర్నిర్మిస్తారు (ఉదాహరణకు, రిచ్‌నెస్, డిస్ట్రిబ్యూషన్) మరియు సమృద్ధి) జీవక్రియలు? ఇచ్చిన శాకాహారి యొక్క ప్రేరేపిత స్థితిని అంచనా వేసేవి ఏ జీవక్రియలు? నిర్దిష్టత, వైవిధ్యం మరియు ప్రేరేపణ దృక్కోణం నుండి, ఆకు-నిర్దిష్ట మెటాబోలైట్ ప్రొఫైల్ యొక్క సమాచార కంటెంట్ కుళ్ళిపోతుంది మరియు శాకాహారులను తినడం నిర్దిష్ట జీవక్రియను సక్రియం చేయగలదని కనుగొనబడింది. ఊహించని విధంగా, అమలు చేయబడిన సమాచార సిద్ధాంత సూచికలలో వివరించినట్లుగా, రెండు శాకాహారులు (రాత్రిపూట తినిపించిన జనరలిస్ట్ Sl) మరియు సోలనేసి నిపుణురాలు శ్రీమతి దాడుల తర్వాత ఫలిత జీవక్రియ పరిస్థితి పెద్ద అతివ్యాప్తిని కలిగి ఉందని మేము గమనించాము. వారి దాణా ప్రవర్తన మరియు ఏకాగ్రత గణనీయంగా భిన్నంగా ఉన్నప్పటికీ. OS (31) లో ఫ్యాటీ యాసిడ్-అమైనో యాసిడ్ కంజుగేట్ (FAC) ఇనిషియేటర్. ప్రామాణిక పంక్చర్ గాయాలకు చికిత్స చేయడానికి హెర్బియోన్ OS ని ఉపయోగించడం ద్వారా, సిమ్యులేట్ హెర్బియోన్ చికిత్స కూడా ఇలాంటి ధోరణిని చూపించింది. హెర్బియోన్ దాడులకు మొక్కల ప్రతిస్పందనను అనుకరించే ఈ ప్రామాణిక విధానం, వివిధ సమయాల్లో వివిధ స్థాయిల నష్టానికి దారితీసే శాకాహారుల తినే ప్రవర్తనలో మార్పుల వల్ల కలిగే గందరగోళ కారకాలను తొలగిస్తుంది (34). OSM యొక్క ప్రధాన కారణమని పిలువబడే FAC, OSS1 లో JAS మరియు ఇతర మొక్కల హార్మోన్ ప్రతిస్పందనలను తగ్గిస్తుంది, అయితే OSS1 వందల రెట్లు తగ్గిస్తుంది (31). అయితే, OSS1 OSM తో పోలిస్తే ఇలాంటి స్థాయి JA సంచితానికి కారణమైంది. అటెన్యుయేటెడ్ నెపెంథెస్‌లో JA ప్రతిస్పందన OSM కి చాలా సున్నితంగా ఉంటుందని గతంలో నిరూపించబడింది, ఇక్కడ FAC నీటితో 1:1000 కరిగించినప్పటికీ దాని కార్యకలాపాలను నిర్వహించగలదు (44). అందువల్ల, OSM తో పోలిస్తే, OSS1 లో FAC చాలా తక్కువగా ఉన్నప్పటికీ, తగినంత JA వ్యాప్తిని ప్రేరేపించడానికి ఇది సరిపోతుంది. OSS1 లో మొక్కల రక్షణ ప్రతిస్పందనలను ప్రేరేపించడానికి పోరిన్ లాంటి ప్రోటీన్లు (45) మరియు ఒలిగోసాకరైడ్లు (46) పరమాణు ఆధారాలుగా ఉపయోగించవచ్చని మునుపటి అధ్యయనాలు చూపించాయి. అయితే, ప్రస్తుత అధ్యయనంలో గమనించిన JA పేరుకుపోవడానికి OSS1 లోని ఈ ఎలిసిటర్లు కారణమా అనేది ఇప్పటికీ అస్పష్టంగా ఉంది.
వేర్వేరు శాకాహారులు లేదా బాహ్య JA లేదా SA (సాలిసిలిక్ ఆమ్లం) (47) వాడకం వల్ల కలిగే అవకలన జీవక్రియ వేలిముద్రలను వివరించే అధ్యయనాలు చాలా తక్కువగా ఉన్నప్పటికీ, మొక్కల గడ్డి నెట్‌వర్క్‌లోని శాకాహారి జాతుల-నిర్దిష్ట కదలికను మరియు నిర్దిష్ట వాటిపై దాని ప్రభావాలను ఎవరూ కలవరపెట్టలేదు. జీవక్రియ యొక్క మొత్తం ప్రభావాన్ని క్రమపద్ధతిలో అధ్యయనం చేస్తారు. వ్యక్తిగత సమాచారం. JAలు కాకుండా ఇతర మొక్కల హార్మోన్లతో అంతర్గత హార్మోన్ నెట్‌వర్క్ కనెక్షన్ శాకాహారుల వల్ల కలిగే జీవక్రియ పునర్వ్యవస్థీకరణ యొక్క విశిష్టతను రూపొందిస్తుందని ఈ విశ్లేషణ మరింత ధృవీకరించింది. ముఖ్యంగా, OSS1 వల్ల కలిగే దానికంటే OSM వల్ల కలిగే ET గణనీయంగా ఎక్కువగా ఉందని మేము గుర్తించాము. ఈ మోడ్ OSMలో ఎక్కువ FAC కంటెంట్‌తో స్థిరంగా ఉంటుంది, ఇది ET పేలుడును ప్రేరేపించడానికి అవసరమైన మరియు తగినంత పరిస్థితి (48). మొక్కలు మరియు శాకాహారుల మధ్య పరస్పర చర్య సందర్భంలో, మొక్క-నిర్దిష్ట మెటాబోలైట్ డైనమిక్స్‌పై ET యొక్క సిగ్నలింగ్ ఫంక్షన్ ఇప్పటికీ అప్పుడప్పుడు ఉంటుంది మరియు ఒకే సమ్మేళన సమూహాన్ని మాత్రమే లక్ష్యంగా చేసుకుంటుంది. అదనంగా, చాలా అధ్యయనాలు ET యొక్క నియంత్రణను అధ్యయనం చేయడానికి ET లేదా దాని పూర్వగాములు లేదా వివిధ నిరోధకాల యొక్క బాహ్య అనువర్తనాన్ని ఉపయోగించాయి, వీటిలో ఈ బాహ్య రసాయన అనువర్తనాలు అనేక నిర్దిష్ట-కాని దుష్ప్రభావాలను ఉత్పత్తి చేస్తాయి. మా జ్ఞానం ప్రకారం, ఈ అధ్యయనం మొక్కల జీవక్రియ డైనమిక్‌లను సమన్వయం చేయడానికి బలహీనమైన ట్రాన్స్‌జెనిక్ మొక్కలను ఉత్పత్తి చేయడానికి మరియు గ్రహించడానికి ET వాడకంలో ET పాత్ర యొక్క మొదటి పెద్ద-స్థాయి క్రమబద్ధమైన పరీక్షను సూచిస్తుంది. హెర్బివోర్-స్పెసిఫిక్ ET ప్రేరణ చివరికి జీవక్రియ ప్రతిస్పందనను మాడ్యులేట్ చేయగలదు. అత్యంత ముఖ్యమైనది ET బయోసింథసిస్ (ACO) మరియు పర్సెప్షన్ (ETR1) జన్యువుల యొక్క ట్రాన్స్‌జెనిక్ మానిప్యులేషన్, ఇది ఫినోలమైడ్‌ల యొక్క శాకాహారి-నిర్దిష్ట డి నోవో సంచితాన్ని వెల్లడించింది. పుట్రెస్సిన్ N-మిథైల్‌ట్రాన్స్‌ఫేరేస్‌ను నియంత్రించడం ద్వారా ET JA- ప్రేరిత నికోటిన్ సంచితాన్ని చక్కగా ట్యూన్ చేయగలదని గతంలో చూపబడింది (49). అయితే, యాంత్రిక దృక్కోణం నుండి, ET ఫినామైడ్ యొక్క ప్రేరణను ఎలా చక్కగా ట్యూన్ చేస్తుందో స్పష్టంగా లేదు. ET యొక్క సిగ్నల్ ట్రాన్స్‌డక్షన్ ఫంక్షన్‌తో పాటు, పాలిఅమినోఫెనాల్ అమైడ్‌లలో పెట్టుబడిని నియంత్రించడానికి జీవక్రియ ప్రవాహాన్ని S-అడెనోసిల్-1-మెథియోనిన్‌కు కూడా మార్చవచ్చు. S-అడెనోసిల్-1-మెథియోనిన్ అనేది పాలిఅమైన్ బయోసింథటిక్ మార్గం యొక్క ET మరియు సాధారణ ఇంటర్మీడియట్. ET సిగ్నల్ ఫినోలామైడ్ స్థాయిని నియంత్రించే విధానం గురించి మరింత అధ్యయనం అవసరం.
చాలా కాలంగా, తెలియని నిర్మాణం యొక్క ప్రత్యేక జీవక్రియలు పెద్ద సంఖ్యలో ఉండటం వల్ల, నిర్దిష్ట జీవక్రియ వర్గాలపై తీవ్రమైన శ్రద్ధ జీవసంబంధమైన పరస్పర చర్యల తర్వాత జీవక్రియ వైవిధ్యం యొక్క తాత్కాలిక మార్పులను ఖచ్చితంగా అంచనా వేయలేకపోయింది. ప్రస్తుతం, సమాచార సిద్ధాంత విశ్లేషణ ఆధారంగా, నిష్పాక్షిక జీవక్రియల ఆధారంగా MS/MS స్పెక్ట్రమ్ సముపార్జన యొక్క ప్రధాన ఫలితం ఏమిటంటే, శాకాహారులు తినే లేదా శాకాహారులను అనుకరించే శాకాహారులు ఆకు జీవక్రియ యొక్క మొత్తం జీవక్రియ వైవిధ్యాన్ని తగ్గిస్తూనే దాని ప్రత్యేకత స్థాయిని పెంచుతున్నారు. శాకాహారుల వల్ల కలిగే జీవక్రియ విశిష్టతలో ఈ తాత్కాలిక పెరుగుదల ట్రాన్స్క్రిప్టోమ్ విశిష్టతలో సినర్జిస్టిక్ పెరుగుదలతో ముడిపడి ఉంది. ఈ పెద్ద జీవక్రియ విశిష్టతకు (అధిక Si విలువను కలిగి ఉండటం) ఎక్కువగా దోహదపడే లక్షణం గతంలో వర్గీకరించబడిన శాకాహార ఫంక్షన్‌తో ప్రత్యేక జీవక్రియ. ఈ నమూనా OD సిద్ధాంతం యొక్క అంచనాకు అనుగుణంగా ఉంటుంది, కానీ జీవక్రియ పునఃప్రోగ్రామింగ్ యొక్క యాదృచ్ఛికతకు సంబంధించిన MT యొక్క అంచనా స్థిరంగా లేదు. అయితే, ఈ డేటా మిశ్రమ నమూనా (ఉత్తమ MT; చిత్రం 1B) యొక్క అంచనాకు కూడా అనుగుణంగా ఉంటుంది, ఎందుకంటే తెలియని రక్షణ విధులతో ఇతర వర్గీకరించని జీవక్రియలు ఇప్పటికీ యాదృచ్ఛిక Si పంపిణీని అనుసరించవచ్చు.
ఈ పరిశోధన ద్వారా మరింత గుర్తించదగిన నమూనా ఏమిటంటే, సూక్ష్మ-పరిణామ స్థాయి (ఒకే మొక్క మరియు పొగాకు జనాభా) నుండి పెద్ద పరిణామ స్థాయి (దగ్గరి సంబంధం ఉన్న పొగాకు జాతులు) వరకు, వివిధ స్థాయిల పరిణామ సంస్థ "ఉత్తమ రక్షణ"లో ఉన్నాయి. శాకాహారుల సామర్థ్యాలలో గణనీయమైన తేడాలు ఉన్నాయి. మూర్ మరియు ఇతరులు (20) మరియు కెస్లర్ మరియు కాల్స్కే (1) స్వతంత్రంగా విట్టేకర్ (50) చేత వేరు చేయబడిన జీవవైవిధ్యం యొక్క మూడు క్రియాత్మక స్థాయిలను రసాయన వైవిధ్యం యొక్క నిర్మాణాత్మక మరియు ప్రేరేపిత తాత్కాలిక మార్పులుగా మార్చడానికి ప్రతిపాదించారు; ఈ రచయితలు కూడా సంగ్రహించలేదు. పెద్ద-స్థాయి జీవక్రియ డేటా సేకరణ కోసం విధానాలు ఈ డేటా నుండి జీవక్రియ వైవిధ్యాన్ని ఎలా లెక్కించాలో కూడా వివరించలేదు. ఈ అధ్యయనంలో, విట్టేకర్ యొక్క క్రియాత్మక వర్గీకరణకు చిన్న సర్దుబాట్లు ఇచ్చిన మొక్కలో MS/MS స్పెక్ట్రా యొక్క వైవిధ్యంగా α- జీవక్రియ వైవిధ్యాన్ని మరియు జనాభా సమూహం యొక్క ప్రాథమిక అంతర్-నిర్దిష్ట జీవక్రియగా β- జీవక్రియ వైవిధ్యాన్ని పరిగణిస్తాయి స్థలం, మరియు γ- జీవక్రియ వైవిధ్యం సారూప్య జాతుల విశ్లేషణ యొక్క పొడిగింపుగా ఉంటుంది.
విస్తృత శ్రేణి శాకాహార జీవక్రియ ప్రతిస్పందనలకు JA సిగ్నల్ చాలా అవసరం. అయితే, జీవక్రియ వైవిధ్యానికి JA బయోసింథసిస్ యొక్క అంతర్-నిర్దిష్ట నియంత్రణ యొక్క సహకారం యొక్క కఠినమైన పరిమాణాత్మక పరీక్ష లేకపోవడం, మరియు అధిక స్థూల పరిణామ స్థాయిలో ఒత్తిడి-ప్రేరిత జీవక్రియ వైవిధ్యీకరణకు JA సిగ్నల్ ఒక సాధారణ సైట్ కాదా అనేది ఇప్పటికీ అస్పష్టంగా ఉంది. నెపెంథెస్ శాకాహార స్వభావం జీవక్రియ ప్రత్యేకతను ప్రేరేపిస్తుందని మరియు నికోటియానా జాతుల జనాభాలో మరియు దగ్గరి సంబంధం ఉన్న నికోటియానా జాతులలో జీవక్రియ ప్రత్యేకత యొక్క వైవిధ్యం JA సిగ్నలింగ్‌తో క్రమబద్ధంగా సానుకూలంగా సంబంధం కలిగి ఉందని మేము గమనించాము. అదనంగా, JA సిగ్నల్ బలహీనపడినప్పుడు, ఒకే జన్యురూప శాకాహారి ద్వారా ప్రేరేపించబడిన జీవక్రియ విశిష్టత రద్దు చేయబడుతుంది (మూర్తి 3, C మరియు E). సహజంగా క్షీణించిన నెపెంథెస్ జనాభా యొక్క జీవక్రియ స్పెక్ట్రం మార్పులు ఎక్కువగా పరిమాణాత్మకంగా ఉంటాయి కాబట్టి, ఈ విశ్లేషణలో జీవక్రియ β వైవిధ్యం మరియు విశిష్టతలో మార్పులు ఎక్కువగా జీవక్రియ-సమృద్ధ సమ్మేళన వర్గాల బలమైన ఉత్తేజం వల్ల సంభవించవచ్చు. ఈ సమ్మేళన తరగతులు జీవక్రియ ప్రొఫైల్‌లో కొంత భాగాన్ని ఆధిపత్యం చేస్తాయి మరియు JA సంకేతాలతో సానుకూల సహసంబంధానికి దారితీస్తాయి.
పొగాకు జాతుల జీవరసాయన విధానాలు దానితో దగ్గరి సంబంధం కలిగి ఉండటం చాలా భిన్నంగా ఉండటం వలన, జీవక్రియలు గుణాత్మక అంశంలో ప్రత్యేకంగా గుర్తించబడతాయి, కాబట్టి ఇది మరింత విశ్లేషణాత్మకమైనది. సంగ్రహించబడిన జీవక్రియ ప్రొఫైల్ యొక్క సమాచార సిద్ధాంతం యొక్క ప్రాసెసింగ్, శాకాహార ప్రేరణ జీవక్రియ గామా వైవిధ్యం మరియు ప్రత్యేకత మధ్య ట్రేడ్-ఆఫ్‌ను తీవ్రతరం చేస్తుందని వెల్లడిస్తుంది. ఈ ట్రేడ్-ఆఫ్‌లో JA సిగ్నల్ ప్రధాన పాత్ర పోషిస్తుంది. జీవక్రియ ప్రత్యేకత పెరుగుదల ప్రధాన OD అంచనాకు అనుగుణంగా ఉంటుంది మరియు JA సిగ్నల్‌తో సానుకూలంగా సంబంధం కలిగి ఉంటుంది, అయితే JA సిగ్నల్ జీవక్రియ గామా వైవిధ్యంతో ప్రతికూలంగా సంబంధం కలిగి ఉంటుంది. ఈ నమూనాలు మొక్కల OD సామర్థ్యం ప్రధానంగా JA యొక్క ప్లాస్టిసిటీ ద్వారా నిర్ణయించబడుతుందని సూచిస్తున్నాయి, ఇది సూక్ష్మ పరిణామ స్థాయిలో లేదా పెద్ద పరిణామ స్థాయిలో అయినా. JA బయోసింథసిస్ లోపాలను అధిగమించే బాహ్య JA అప్లికేషన్ ప్రయోగాలు దగ్గరి సంబంధం ఉన్న పొగాకు జాతులను సిగ్నల్-రెస్పాన్సివ్ మరియు సిగ్నల్-రెస్పాన్సివ్ జాతులుగా వేరు చేయవచ్చని వెల్లడిస్తున్నాయి, వాటి JA మోడ్ మరియు శాకాహారులచే ప్రేరేపించబడిన జీవక్రియ ప్లాస్టిసిటీ లాగానే. సిగ్నల్ నాన్-రెస్పాన్సివ్ జాతులు ఎండోజెనస్ JA ను ఉత్పత్తి చేయలేకపోవడం వల్ల స్పందించలేవు మరియు అందువల్ల శారీరక పరిమితులకు లోబడి ఉంటాయి. ఇది JA సిగ్నలింగ్ మార్గంలోని కొన్ని కీలక జన్యువులలోని ఉత్పరివర్తనాల వల్ల సంభవించవచ్చు (N. క్రెసెన్స్‌లో AOS మరియు JAR4). ఈ ఇంటర్‌స్పెసీస్ స్థూల పరిణామ నమూనాలు ప్రధానంగా అంతర్గత హార్మోన్ అవగాహన మరియు ప్రతిస్పందనలో మార్పుల ద్వారా నడపబడతాయని ఈ ఫలితం హైలైట్ చేస్తుంది.
మొక్కలు మరియు శాకాహారుల మధ్య పరస్పర చర్యతో పాటు, జీవక్రియ వైవిధ్యం యొక్క అన్వేషణ పర్యావరణానికి జీవసంబంధమైన అనుసరణ మరియు సంక్లిష్ట సమలక్షణ లక్షణాల పరిణామం యొక్క పరిశోధనలో అన్ని ముఖ్యమైన సైద్ధాంతిక పురోగతికి సంబంధించినది. ఆధునిక MS సాధనాల ద్వారా పొందిన డేటా పరిమాణంలో పెరుగుదలతో, జీవక్రియ వైవిధ్యంపై పరికల్పన పరీక్ష ఇప్పుడు వ్యక్తిగత/వర్గ జీవక్రియ వ్యత్యాసాలను అధిగమించి ఊహించని నమూనాలను బహిర్గతం చేయడానికి ప్రపంచ విశ్లేషణను చేయగలదు. పెద్ద-స్థాయి విశ్లేషణ ప్రక్రియలో, డేటాను అన్వేషించడానికి ఉపయోగించగల అర్థవంతమైన పటాలను రూపొందించే ఆలోచన ఒక ముఖ్యమైన రూపకం. అందువల్ల, నిష్పాక్షికమైన MS/MS జీవక్రియ మరియు సమాచార సిద్ధాంతం యొక్క ప్రస్తుత కలయిక యొక్క ముఖ్యమైన ఫలితం ఏమిటంటే, ఇది వివిధ వర్గీకరణ ప్రమాణాలపై జీవక్రియ వైవిధ్యాన్ని బ్రౌజ్ చేయడానికి మ్యాప్‌లను నిర్మించడానికి ఉపయోగించే ఒక సాధారణ మెట్రిక్‌ను అందిస్తుంది. ఇది ఈ పద్ధతి యొక్క ప్రాథమిక అవసరం. సూక్ష్మ/స్థూల పరిణామం మరియు సమాజ జీవావరణ శాస్త్రం యొక్క అధ్యయనం.
స్థూల-పరిణామ స్థాయిలో, ఎర్లిచ్ మరియు రావెన్ (51) యొక్క మొక్క-కీటకాల సహ-పరిణామ సిద్ధాంతం యొక్క ప్రధాన అంశం ఏమిటంటే, అంతర్జాతుల జీవక్రియ వైవిధ్యం యొక్క వైవిధ్యం మొక్కల వంశాల వైవిధ్యీకరణకు కారణమని అంచనా వేయడం. అయితే, ఈ సెమినల్ పని ప్రచురించబడిన యాభై సంవత్సరాలలో, ఈ పరికల్పన చాలా అరుదుగా పరీక్షించబడింది (52). ఇది ఎక్కువగా సుదూర మొక్కల వంశాలలో పోల్చదగిన జీవక్రియ లక్షణాల ఫైలోజెనెటిక్ లక్షణాల కారణంగా ఉంది. లక్ష్య విశ్లేషణ పద్ధతులను ఎంకరేజ్ చేయడానికి ఈ అరుదుగా ఉపయోగించవచ్చు. సమాచార సిద్ధాంతం ద్వారా ప్రాసెస్ చేయబడిన ప్రస్తుత MS/MS వర్క్‌ఫ్లో తెలియని జీవక్రియల యొక్క MS/MS నిర్మాణ సారూప్యతను (ముందస్తు జీవక్రియ ఎంపిక లేకుండా) లెక్కించి, ఈ MS/MSలను MS/MS సమితిగా మారుస్తుంది, అందువలన ప్రొఫెషనల్ జీవక్రియలో ఈ స్థూల-పరిణామ నమూనాలను వర్గీకరణ స్థాయిలో పోల్చారు. సాధారణ గణాంక సూచికలు. ఈ ప్రక్రియ ఫైలోజెనెటిక్ విశ్లేషణకు సమానంగా ఉంటుంది, ఇది ముందస్తు అంచనా లేకుండా వైవిధ్యీకరణ లేదా పాత్ర పరిణామం రేటును లెక్కించడానికి శ్రేణి అమరికను ఉపయోగించవచ్చు.
జీవరసాయన స్థాయిలో, ఫిర్న్ మరియు జోన్స్ (53) యొక్క స్క్రీనింగ్ పరికల్పన, గతంలో సంబంధం లేని లేదా ప్రత్యామ్నాయ జీవక్రియల జీవసంబంధ కార్యకలాపాలను అమలు చేయడానికి ముడి పదార్థాలను అందించడానికి జీవక్రియ వైవిధ్యం వివిధ స్థాయిలలో నిర్వహించబడుతుందని చూపిస్తుంది. సమాచార సిద్ధాంత పద్ధతులు మెటాబోలైట్ స్పెషలైజేషన్ సమయంలో సంభవించే ఈ జీవక్రియ-నిర్దిష్ట పరిణామ పరివర్తనలను ప్రతిపాదిత పరిణామ స్క్రీనింగ్ ప్రక్రియలో భాగంగా లెక్కించగల ఒక చట్రాన్ని అందిస్తాయి: తక్కువ విశిష్టత నుండి అధిక విశిష్టతకు జీవశాస్త్రపరంగా చురుకైన అనుసరణ ఇచ్చిన వాతావరణం యొక్క నిరోధిత జీవక్రియలు.
మొత్తం మీద, పరమాణు జీవశాస్త్రం యొక్క ప్రారంభ రోజులలో, ముఖ్యమైన మొక్కల రక్షణ సిద్ధాంతాలు అభివృద్ధి చేయబడ్డాయి మరియు తగ్గింపు పరికల్పన-ఆధారిత పద్ధతులు శాస్త్రీయ పురోగతికి ఏకైక మార్గంగా విస్తృతంగా పరిగణించబడుతున్నాయి. మొత్తం జీవక్రియను కొలవడానికి సాంకేతిక పరిమితులు దీనికి కారణం. ఇతర కారణ విధానాలను ఎంచుకోవడంలో పరికల్పన-ఆధారిత పద్ధతులు ముఖ్యంగా ఉపయోగకరంగా ఉన్నప్పటికీ, జీవరసాయన నెట్‌వర్క్‌ల గురించి మన అవగాహనను పెంచే వాటి సామర్థ్యం సమకాలీన డేటా-ఇంటెన్సివ్ సైన్స్‌లో ప్రస్తుతం అందుబాటులో ఉన్న గణన పద్ధతుల కంటే చాలా పరిమితం. అందువల్ల, అంచనా వేయలేని సిద్ధాంతాలు అందుబాటులో ఉన్న డేటా పరిధికి మించి ఉన్నాయి, కాబట్టి పరిశోధనా రంగంలో పురోగతి యొక్క ఊహాత్మక సూత్రం/పరీక్ష చక్రం రద్దు చేయబడదు (4). ఇక్కడ ప్రవేశపెట్టబడిన జీవక్రియల గణన వర్క్‌ఫ్లో జీవక్రియ వైవిధ్యం యొక్క ఇటీవలి (ఎలా) మరియు చివరి (ఎందుకు) సమస్యలపై ఆసక్తిని తిరిగి రేకెత్తించగలదని మరియు సిద్ధాంతపరంగా మార్గనిర్దేశం చేయబడిన డేటా సైన్స్ యొక్క కొత్త యుగానికి దోహదపడుతుందని మేము ముందుగానే ఊహించాము. మునుపటి తరాలకు స్ఫూర్తినిచ్చిన ముఖ్యమైన సిద్ధాంతాలను ఈ యుగం తిరిగి పరిశీలించింది.
ఒకే గులాబీ వికసించే మొక్క యొక్క లేత రంగు కాడ మొక్క ఆకుపై రెండవ ఇన్‌స్టార్ లార్వా లేదా Sl లార్వాను పెంచడం ద్వారా ప్రత్యక్ష శాకాహారి దాణా జరుగుతుంది, ప్రతి మొక్కకు 10 మొక్కల ప్రతిరూపాలు ఉంటాయి. కీటకాల లార్వాలను బిగింపులతో బిగించి, మిగిలిన ఆకు కణజాలాన్ని సంక్రమణ తర్వాత 24 మరియు 72 గంటల తర్వాత సేకరించి త్వరగా ఘనీభవించి, జీవక్రియలను సంగ్రహించారు.
శాకాహార చికిత్సను అత్యంత సమకాలీకరించిన పద్ధతిలో అనుకరించండి. ఫాబ్రిక్ దండ పెరుగుదల దశలో మొక్క యొక్క పూర్తిగా విస్తరించిన మూడు ఆకుల మధ్యభాగం యొక్క ప్రతి వైపు మూడు వరుసల ముళ్ళను పంక్చర్ చేయడానికి ఫాబ్రిక్ నమూనా చక్రాలను ఉపయోగించడం ఈ పద్ధతి, మరియు వెంటనే 1:5 డైల్యూటెడ్ Ms. లేదా పంక్చర్ గాయంలోకి S1 OS చొప్పించడానికి చేతి తొడుగులు ఉన్న వేళ్లను ఉపయోగించండి. పైన వివరించిన విధంగా ఒక ఆకును కోసి ప్రాసెస్ చేయండి. ప్రాథమిక జీవక్రియలు మరియు మొక్కల హార్మోన్లను సంగ్రహించడానికి గతంలో వివరించిన పద్ధతిని ఉపయోగించండి (54).
బాహ్య JA అప్లికేషన్ల కోసం, ప్రతి జాతికి చెందిన ఆరు గులాబీ వికసించే మొక్కలలోని మూడు పెటియోల్ ఆకులను 150μg MeJA (Lan + MeJA) కలిగిన 20μl లానోలిన్ పేస్ట్‌తో మరియు 20μl లానోలిన్ ప్లస్ గాయం చికిత్స (Lan + W)తో చికిత్స చేస్తారు, లేదా నియంత్రణగా 20μl స్వచ్ఛమైన లానోలిన్‌ను ఉపయోగిస్తారు. ఆకులను చికిత్స తర్వాత 72 గంటలు కోయడం, ద్రవ నత్రజనిలో స్నాప్-ఫ్రోజెన్ చేయడం మరియు ఉపయోగం వరకు -80°C వద్ద నిల్వ చేయడం జరుగుతుంది.
మా పరిశోధనా బృందంలో నాలుగు JA మరియు ET ట్రాన్స్‌జెనిక్ లైన్లు, అవి irAOC (36), irCOI1 (55), irACO మరియు sETR1 (48) గుర్తించబడ్డాయి. irAOC JA మరియు JA-Ile స్థాయిలలో తగ్గుదలని బలంగా చూపించింది, అయితే irCOI1 JAలకు సున్నితంగా లేదు. EVతో పోలిస్తే, JA-Ile చేరడం పెరిగింది. అదేవిధంగా, irACO ET ఉత్పత్తిని తగ్గిస్తుంది మరియు EVతో పోలిస్తే, ETకి సున్నితంగా లేని sETR1, ET ఉత్పత్తిని పెంచుతుంది.
ET కొలతను నాన్-ఇన్వాసివ్‌గా నిర్వహించడానికి ఫోటోఅకౌస్టిక్ లేజర్ స్పెక్ట్రోమీటర్ (సెన్సార్ సెన్స్ ETD-300 రియల్-టైమ్ ET సెన్సార్) ఉపయోగించబడుతుంది. చికిత్స తర్వాత వెంటనే, సగం ఆకులను కత్తిరించి 4-ml సీలు చేసిన గాజు సీసాలోకి బదిలీ చేశారు మరియు హెడ్‌స్పేస్ 5 గంటల్లోపు పేరుకుపోయేలా అనుమతించారు. కొలత సమయంలో, ప్రతి సీసాను 8 నిమిషాల పాటు 2 లీటర్లు/గంట స్వచ్ఛమైన గాలితో ఫ్లష్ చేశారు, ఇది గతంలో CO2 మరియు నీటిని తొలగించడానికి సెన్సార్ సెన్స్ అందించిన ఉత్ప్రేరకం గుండా వెళ్ళింది.
మైక్రోఅరే డేటా మొదట (35)లో ప్రచురించబడింది మరియు నేషనల్ సెంటర్ ఫర్ బయోటెక్నాలజీ ఇన్ఫర్మేషన్ (NCBI) జీన్ ఎక్స్‌ప్రెషన్ కాంప్రహెన్సివ్ డేటాబేస్ (యాక్సెషన్ నంబర్ GSE30287)లో సేవ్ చేయబడింది. W + OSMల చికిత్స మరియు పాడైపోని నియంత్రణ వలన కలిగే ఆకులకు సంబంధించిన డేటాను ఈ అధ్యయనం కోసం సంగ్రహించారు. ముడి తీవ్రత log2. గణాంక విశ్లేషణకు ముందు, బేస్‌లైన్‌ను R సాఫ్ట్‌వేర్ ప్యాకేజీని ఉపయోగించి దాని 75వ శాతానికి మార్చారు మరియు సాధారణీకరించారు.
నికోటియానా జాతుల అసలు RNA సీక్వెన్సింగ్ (RNA-seq) డేటాను NCBI షార్ట్ రీడింగ్ ఆర్కైవ్స్ (SRA) నుండి తిరిగి పొందారు, ప్రాజెక్ట్ నంబర్ PRJNA301787, దీనిని జౌ మరియు ఇతరులు నివేదించారు. (39) మరియు (56)లో వివరించిన విధంగా కొనసాగండి. నికోటియానా జాతులకు అనుగుణంగా W + W, W + OSM మరియు W + OSS1 ద్వారా ప్రాసెస్ చేయబడిన ముడి డేటాను ఈ అధ్యయనంలో విశ్లేషణ కోసం ఎంపిక చేశారు మరియు ఈ క్రింది విధంగా ప్రాసెస్ చేశారు: మొదట, ముడి RNA-seq రీడింగ్‌లను FASTQ ఫార్మాట్‌లోకి మార్చారు. HISAT2 FASTQని SAMగా మారుస్తుంది మరియు SAMtools SAM ఫైల్‌లను క్రమబద్ధీకరించిన BAM ఫైల్‌లుగా మారుస్తుంది. జన్యు వ్యక్తీకరణను లెక్కించడానికి StringTie ఉపయోగించబడుతుంది మరియు దాని వ్యక్తీకరణ పద్ధతి ఏమిటంటే మిలియన్ సీక్వెన్స్డ్ ట్రాన్స్క్రిప్షన్ ఫ్రాగ్‌మెంట్‌లకు వెయ్యి బేస్ ఫ్రాగ్‌మెంట్‌లకు ఫ్రాగ్‌మెంట్‌లు ఉంటాయి.
విశ్లేషణలో ఉపయోగించిన అక్లైమ్ క్రోమాటోగ్రాఫిక్ కాలమ్ (150 మిమీ x 2.1 మిమీ; కణ పరిమాణం 2.2μm) మరియు 4 మిమీ x 4 మిమీ గార్డ్ కాలమ్ ఒకే పదార్థాన్ని కలిగి ఉంటాయి. డయోనెక్స్ అల్టిమేట్ 3000 అల్ట్రా హై పెర్ఫార్మెన్స్ లిక్విడ్ క్రోమాటోగ్రఫీ (UHPLC) వ్యవస్థలో కింది బైనరీ గ్రేడియంట్ ఉపయోగించబడుతుంది: 0 నుండి 0.5 నిమిషాలు, ఐసోక్రాటిక్ 90% A [డీయోనైజ్డ్ వాటర్, 0.1% (v/v) అసిటోనిట్రైల్ మరియు 0.05% ఫార్మిక్ యాసిడ్], 10% B (అసిటోనిట్రైల్ మరియు 0.05% ఫార్మిక్ యాసిడ్); 0.5 నుండి 23.5 నిమిషాలు, గ్రేడియంట్ దశ వరుసగా 10% A మరియు 90% B; 23.5 నుండి 25 నిమిషాలు, ఐసోక్రాటిక్ 10% A మరియు 90% B. ప్రవాహ రేటు 400μl/నిమి. అన్ని MS విశ్లేషణల కోసం, కాలమ్ ఎల్యూయెంట్‌ను పాజిటివ్ అయనీకరణ మోడ్‌లో పనిచేసే ఎలక్ట్రోస్ప్రే సోర్స్‌తో కూడిన క్వాడ్రూపోల్ మరియు టైమ్-ఆఫ్-ఫ్లైట్ (qTOF) ఎనలైజర్‌లోకి ఇంజెక్ట్ చేయండి (క్యాపిల్లరీ వోల్టేజ్, 4500 V; క్యాపిల్లరీ అవుట్‌లెట్ 130 V; ఆరబెట్టే ఉష్ణోగ్రత 200°C; ఆరబెట్టే వాయు ప్రవాహం 10 లీటర్లు/నిమిషం).
మొత్తం గుర్తించదగిన జీవక్రియ ప్రొఫైల్ గురించి నిర్మాణాత్మక సమాచారాన్ని పొందడానికి డేటా నుండి అసంబద్ధం లేదా వేరు చేయలేని MS / MS ఫ్రాగ్మెంట్ విశ్లేషణను (ఇకపై MS / MS అని పిలుస్తారు) నిర్వహించండి. విచక్షణారహిత MS/MS పద్ధతి యొక్క భావన క్వాడ్రూపోల్ చాలా పెద్ద ద్రవ్యరాశి ఐసోలేషన్ విండోను కలిగి ఉందనే వాస్తవంపై ఆధారపడి ఉంటుంది [అందువల్ల, అన్ని ద్రవ్యరాశి-ఛార్జ్ నిష్పత్తి (m/z) సంకేతాలను శకలాలుగా పరిగణించండి]. ఈ కారణంగా, ఇంపాక్ట్ II పరికరం CE టిల్ట్‌ను సృష్టించలేకపోయినందున, పెరిగిన ఘర్షణ-ప్రేరిత డిస్సోసియేషన్ ఘర్షణ శక్తి (CE) విలువలను ఉపయోగించి అనేక స్వతంత్ర విశ్లేషణలు నిర్వహించబడ్డాయి. సంక్షిప్తంగా, మొదట UHPLC-ఎలక్ట్రోస్ప్రే అయనీకరణ/qTOF-MS ద్వారా సింగిల్ మాస్ స్పెక్ట్రోమెట్రీ మోడ్ (ఇన్-సోర్స్ ఫ్రాగ్మెంటేషన్ ద్వారా ఉత్పత్తి చేయబడిన తక్కువ ఫ్రాగ్మెంటేషన్ పరిస్థితులు) ఉపయోగించి నమూనాను విశ్లేషించండి, 5 Hz పునరావృత ఫ్రీక్వెన్సీ వద్ద m/z 50 నుండి 1500 వరకు స్కానింగ్ చేయండి. MS/MS విశ్లేషణ కోసం నైట్రోజన్‌ను ఘర్షణ వాయువుగా ఉపయోగించండి మరియు ఈ క్రింది నాలుగు వేర్వేరు ఘర్షణ-ప్రేరిత డిస్సోసియేషన్ వోల్టేజ్‌ల వద్ద స్వతంత్ర కొలతలను నిర్వహించండి: 20, 30, 40, మరియు 50 eV. కొలత ప్రక్రియ అంతటా, క్వాడ్రూపోల్ m/z 50 నుండి 1500 వరకు అతిపెద్ద ద్రవ్యరాశి ఐసోలేషన్ విండోను కలిగి ఉంటుంది. ఫ్రంట్ బాడీ m/z మరియు ఐసోలేషన్ వెడల్పు ప్రయోగం 200కి సెట్ చేయబడినప్పుడు, ద్రవ్యరాశి పరిధి పరికరం యొక్క ఆపరేటింగ్ సాఫ్ట్‌వేర్ ద్వారా స్వయంచాలకంగా సక్రియం చేయబడుతుంది మరియు 0 Da. సింగిల్ మాస్ మోడ్‌లో ఉన్నట్లుగా ద్రవ్యరాశి భాగాల కోసం స్కాన్ చేయండి. ద్రవ్యరాశి క్రమాంకనం కోసం సోడియం ఫార్మాట్ (50 ml ఐసోప్రొపనాల్, 200 μl ఫార్మిక్ ఆమ్లం మరియు 1 ml 1M NaOH జల ద్రావణం) ఉపయోగించండి. బ్రూకర్ యొక్క హై-ప్రెసిషన్ కాలిబ్రేషన్ అల్గోరిథం ఉపయోగించి, ఇచ్చిన సమయ వ్యవధిలో సగటు స్పెక్ట్రమ్‌ను అమలు చేసిన తర్వాత డేటా ఫైల్ క్రమాంకనం చేయబడుతుంది. ముడి డేటా ఫైల్‌లను NetCDF ఫార్మాట్‌లోకి మార్చడానికి డేటా విశ్లేషణ v4.0 సాఫ్ట్‌వేర్ (బ్రూక్ డాల్టన్, బ్రెమెన్, జర్మనీ) యొక్క ఎగుమతి ఫంక్షన్‌ను ఉపయోగించండి. MS/MS డేటా సెట్ ఓపెన్ మెటబోలోమిక్స్ డేటాబేస్ మెటాబోలైట్స్ (www.ebi.ac.uk) లో యాక్సెషన్ నంబర్‌తో సేవ్ చేయబడింది. MTBLS1471.
తక్కువ మరియు అధిక ఘర్షణ శక్తి మరియు కొత్తగా అమలు చేయబడిన నియమాల కోసం MS1 మరియు MS/MS నాణ్యత సంకేతాల మధ్య సహసంబంధ విశ్లేషణ ద్వారా MS/MS అసెంబ్లీని గ్రహించవచ్చు. ఉత్పత్తికి పూర్వగామి పంపిణీ యొక్క సహసంబంధ విశ్లేషణను గ్రహించడానికి R స్క్రిప్ట్ ఉపయోగించబడుతుంది మరియు నియమాలను అమలు చేయడానికి C# స్క్రిప్ట్ (https://github.com/MPI-DL/indiscriminant-MS-MS-assembly-pipeline) ఉపయోగించబడుతుంది.
కొన్ని నమూనాలలో మాత్రమే కొన్ని m/z లక్షణాలను గుర్తించడం వల్ల కలిగే తప్పుడు సానుకూల లోపాలను తగ్గించడానికి, మేము R ప్యాకేజీ XCMS (నేపథ్య శబ్దం దిద్దుబాటు కోసం) యొక్క “నిండిన పీక్” ఫంక్షన్‌ను ఉపయోగిస్తాము. “NA” (గుర్తించబడని పీక్) తీవ్రతను భర్తీ చేయడానికి XCMS (నేపథ్య శబ్దం దిద్దుబాటు కోసం) ఉపయోగించాలి. ఫిల్ పీక్ ఫంక్షన్‌ను ఉపయోగించినప్పుడు, డేటా సెట్‌లో ఇంకా చాలా “0″ తీవ్రత విలువలు ఉన్నాయి, అవి సహసంబంధ గణనను ప్రభావితం చేస్తాయి. అప్పుడు, మేము నిండిన పీక్ ఫంక్షన్‌ను ఉపయోగించినప్పుడు మరియు నిండిన పీక్ ఫంక్షన్‌ను ఉపయోగించనప్పుడు పొందిన డేటా ప్రాసెసింగ్ ఫలితాలను పోల్చి చూస్తాము మరియు సగటు సరిదిద్దబడిన అంచనా విలువ ఆధారంగా నేపథ్య శబ్దం విలువను లెక్కిస్తాము, ఆపై ఈ 0 తీవ్రత విలువలను లెక్కించిన నేపథ్య విలువతో భర్తీ చేస్తాము. నేపథ్య విలువ కంటే మూడు రెట్లు ఎక్కువ తీవ్రత ఉన్న లక్షణాలను మాత్రమే మేము పరిగణించాము మరియు వాటిని “నిజమైన శిఖరాలు”గా పరిగణించాము. PCC గణనల కోసం, నమూనా పూర్వగామి (MS1) యొక్క m/z సిగ్నల్‌లు మరియు కనీసం ఎనిమిది నిజమైన శిఖరాలతో కూడిన ఫ్రాగ్మెంట్ డేటా సెట్‌లు మాత్రమే పరిగణించబడతాయి.
మొత్తం నమూనాలోని పూర్వగామి నాణ్యత లక్షణం యొక్క తీవ్రత తక్కువ లేదా అధిక తాకిడి శక్తికి లోనయ్యే అదే నాణ్యత లక్షణం యొక్క తగ్గిన తీవ్రతతో గణనీయంగా సహసంబంధం కలిగి ఉంటే మరియు ఆ లక్షణాన్ని CAMERA ద్వారా ఐసోటోప్ శిఖరంగా లేబుల్ చేయకపోతే, దానిని మరింత నిర్వచించవచ్చు. అప్పుడు, 3 సెకన్లలోపు అన్ని సాధ్యమైన పూర్వగామి-ఉత్పత్తి జతలను లెక్కించడం ద్వారా (పీక్ నిలుపుదల కోసం అంచనా వేసిన నిలుపుదల సమయ విండో), సహసంబంధ విశ్లేషణ నిర్వహించబడుతుంది. m/z విలువ పూర్వగామి విలువ కంటే తక్కువగా ఉన్నప్పుడు మరియు అది ఉద్భవించిన పూర్వగామిగా ఉన్న డేటా సెట్‌లోని అదే నమూనా స్థానంలో MS/MS ఫ్రాగ్మెంటేషన్ సంభవించినప్పుడు మాత్రమే, దానిని ఒక శకలంగా పరిగణిస్తారు.
ఈ రెండు సాధారణ నియమాల ఆధారంగా, గుర్తించబడిన పూర్వగామి యొక్క m/z కంటే ఎక్కువ m/z విలువలతో పేర్కొన్న భాగాలను మేము మినహాయించాము మరియు పూర్వగామి కనిపించే నమూనా స్థానం మరియు పేర్కొన్న భాగాన్ని బట్టి. MS1 మోడ్‌లో ఉత్పత్తి చేయబడిన అనేక ఇన్-సోర్స్ భాగాల ద్వారా ఉత్పత్తి చేయబడిన నాణ్యత లక్షణాలను అభ్యర్థి పూర్వగాములుగా ఎంచుకోవడం కూడా సాధ్యమే, తద్వారా అనవసరమైన MS/MS సమ్మేళనాలను ఉత్పత్తి చేస్తుంది. ఈ డేటా రిడెండెన్సీని తగ్గించడానికి, స్పెక్ట్రా యొక్క NDP సారూప్యత 0.6 మించి ఉంటే మరియు అవి CAMERA ద్వారా ఉల్లేఖించబడిన క్రోమాటోగ్రామ్ “pcgroup”కి చెందినవి అయితే, మేము వాటిని విలీనం చేస్తాము. చివరగా, వేర్వేరు ఘర్షణ శక్తుల వద్ద ఒకే m/z విలువతో అన్ని అభ్యర్థి శిఖరాలలో అత్యధిక తీవ్రత శిఖరాన్ని ఎంచుకోవడం ద్వారా పూర్వగామి మరియు భాగాలతో అనుబంధించబడిన నాలుగు CE ఫలితాలను తుది డీకన్వోల్యూటెడ్ కాంపోజిట్ స్పెక్ట్రంలో విలీనం చేస్తాము. తదుపరి ప్రాసెసింగ్ దశలు మిశ్రమ స్పెక్ట్రం యొక్క భావనపై ఆధారపడి ఉంటాయి మరియు ఫ్రాగ్మెంటేషన్ సంభావ్యతను పెంచడానికి అవసరమైన విభిన్న CE పరిస్థితులను పరిగణనలోకి తీసుకుంటాయి, ఎందుకంటే కొన్ని శకలాలు నిర్దిష్ట ఘర్షణ శక్తి కింద మాత్రమే గుర్తించబడతాయి.
జీవక్రియ ప్రొఫైల్ యొక్క ప్రేరేపణను లెక్కించడానికి RDPI (30) ఉపయోగించబడింది. జీవక్రియ స్పెక్ట్రం వైవిధ్యం (Hj సూచిక) మార్టినెజ్ మరియు ఇతరులు వివరించిన క్రింది సమీకరణాన్ని ఉపయోగించి MS/MS ఫ్రీక్వెన్సీ పంపిణీ యొక్క షానన్ ఎంట్రోపీని ఉపయోగించి MS/MS పూర్వగాముల సమృద్ధి నుండి తీసుకోబడింది. (8). Hj = −∑i = 1mPijlog2(Pij) ఇక్కడ Pij అనేది j-th నమూనాలోని i-th MS/MS యొక్క సాపేక్ష ఫ్రీక్వెన్సీకి అనుగుణంగా ఉంటుంది (j = 1, 2,…, m) (i = 1, 2, …, m) t).
మెటబాలిక్ స్పెసిసిటీ (Si ఇండెక్స్) అనేది పరిగణించబడుతున్న నమూనాల మధ్య ఫ్రీక్వెన్సీకి సంబంధించి ఇచ్చిన MS/MS యొక్క వ్యక్తీకరణ గుర్తింపుగా నిర్వచించబడింది. MS/MS స్పెసిఫిసిటీని Si = 1t (∑j = 1tPijPilog2PijPi)గా లెక్కించబడుతుంది.
ప్రతి j నమూనా యొక్క జీవక్రియ-నిర్దిష్ట δj సూచికను మరియు MS/MS విశిష్టత యొక్క సగటును కొలవడానికి క్రింది సూత్రాన్ని ఉపయోగించండి δj = ∑i = 1mPijSi
MS/MS స్పెక్ట్రాలను జతలుగా సమలేఖనం చేస్తారు మరియు రెండు స్కోర్‌ల ఆధారంగా సారూప్యతను లెక్కిస్తారు. ముందుగా, ప్రామాణిక NDP (కొసైన్ కోరిలేషన్ పద్ధతి అని కూడా పిలుస్తారు) ఉపయోగించి, స్పెక్ట్రా మధ్య సెగ్మెంట్ సారూప్యతను స్కోర్ చేయడానికి క్రింది సమీకరణాన్ని ఉపయోగించండి NDP = (∑iS1 & S2WS1, iWS2, i) 2∑iWS1, i2∑iWS2, i2 ఇక్కడ S1 మరియు S2 తదనుగుణంగా, స్పెక్ట్రం 1 మరియు స్పెక్ట్రం 2, అలాగే WS1, i మరియు WS2 లకు, i అనేది పీక్ తీవ్రత ఆధారంగా బరువును సూచిస్తుంది, ఆ రెండు స్పెక్ట్రాల మధ్య i-వ సాధారణ శిఖరం యొక్క వ్యత్యాసం 0.01 Da కంటే తక్కువగా ఉంటుంది. బరువును ఈ క్రింది విధంగా లెక్కించారు: W = [పీక్ తీవ్రత] m [నాణ్యత] n, m = 0.5, n = 2, మాస్‌బ్యాంక్ సూచించినట్లు.
రెండవ స్కోరింగ్ పద్ధతి అమలు చేయబడింది, ఇందులో MS/MS మధ్య భాగస్వామ్య NLని విశ్లేషించడం జరిగింది. ఈ ప్రయోజనం కోసం, మేము MS ఫ్రాగ్మెంటేషన్ ప్రక్రియలో తరచుగా ఎదుర్కొనే 52 NL జాబితాలను మరియు బలహీనమైన నెపెంథెస్ జాతుల ద్వితీయ జీవక్రియల MS/MS స్పెక్ట్రం కోసం గతంలో వ్యాఖ్యానించబడిన మరింత నిర్దిష్ట NL (డేటా ఫైల్ S1)ను ఉపయోగించాము (9, 26). ప్రతి MS/MS కోసం 1 మరియు 0 యొక్క బైనరీ వెక్టర్‌ను సృష్టించండి, ఇది వరుసగా కొన్ని NL యొక్క ప్రస్తుత మరియు ఉనికిలో లేని వాటికి అనుగుణంగా ఉంటుంది. యూక్లిడియన్ దూర సారూప్యత ఆధారంగా, ప్రతి జత బైనరీ NL వెక్టర్‌లకు NL సారూప్యత స్కోరు లెక్కించబడుతుంది.
డ్యూయల్ క్లస్టరింగ్ చేయడానికి, మేము R ప్యాకేజీ DiffCoEx ను ఉపయోగించాము, ఇది వెయిటెడ్ జీన్ కో-ఎక్స్‌ప్రెషన్ అనాలిసిస్ (WGCNA) యొక్క పొడిగింపుపై ఆధారపడి ఉంటుంది. MS/MS స్పెక్ట్రా యొక్క NDP మరియు NL స్కోరింగ్ మాతృకలను ఉపయోగించి, తులనాత్మక సహసంబంధ మాతృకను లెక్కించడానికి మేము DiffCoEx ను ఉపయోగించాము. “cutreeDynamic” పరామితిని పద్ధతి = “హైబ్రిడ్”, cutHeight = 0.9999, deepSplit = T, మరియు minClusterSize = 10 కు సెట్ చేయడం ద్వారా బైనరీ క్లస్టరింగ్ నిర్వహించబడుతుంది. DiffCoEx యొక్క R సోర్స్ కోడ్‌ను టెస్సన్ మరియు ఇతరులు అదనపు ఫైల్ 1 నుండి డౌన్‌లోడ్ చేసుకున్నారు. (57); అవసరమైన R WGCNA సాఫ్ట్‌వేర్ ప్యాకేజీని https://horvath.genetics.ucla.edu/html/CoexpressionNetwork/Rpackages/WGCNA లో కనుగొనవచ్చు.
MS/MS మాలిక్యులర్ నెట్‌వర్క్ విశ్లేషణను నిర్వహించడానికి, మేము NDP మరియు NL సారూప్య రకాల ఆధారంగా జత చేసిన స్పెక్ట్రల్ కనెక్టివిటీని లెక్కించాము మరియు CyFilescape yFiles లేఅవుట్ అల్గోరిథం ఎక్స్‌టెన్షన్ అప్లికేషన్‌లో ఆర్గానిక్ లేఅవుట్‌ని ఉపయోగించి నెట్‌వర్క్ టోపోలాజీని దృశ్యమానం చేయడానికి Cytoscape సాఫ్ట్‌వేర్‌ను ఉపయోగించాము.
డేటాపై గణాంక విశ్లేషణ చేయడానికి R వెర్షన్ 3.0.1ని ఉపయోగించండి. టూ-వే అనాలిసిస్ ఆఫ్ వేరియెన్స్ (ANOVA) ఉపయోగించి గణాంక ప్రాముఖ్యతను అంచనా వేశారు, తరువాత టుకే యొక్క నిజాయితీగా ముఖ్యమైన తేడా (HSD) పోస్ట్-హాక్ టెస్ట్ జరిగింది. శాకాహార చికిత్స మరియు నియంత్రణ మధ్య వ్యత్యాసాన్ని విశ్లేషించడానికి, ఒకే వైవిధ్యం కలిగిన రెండు సమూహాల నమూనాల రెండు-తోక పంపిణీని స్టూడెంట్స్ టి పరీక్షను ఉపయోగించి విశ్లేషించారు.
ఈ వ్యాసం కోసం అనుబంధ సామగ్రి కోసం, దయచేసి http://advances.sciencemag.org/cgi/content/full/6/24/eaaz0381/DC1 చూడండి.
ఇది క్రియేటివ్ కామన్స్ అట్రిబ్యూషన్-నాన్-కమర్షియల్ లైసెన్స్ నిబంధనల ప్రకారం పంపిణీ చేయబడిన ఓపెన్ యాక్సెస్ ఆర్టికల్, ఇది ఏ మాధ్యమంలోనైనా ఉపయోగం, పంపిణీ మరియు పునరుత్పత్తిని అనుమతిస్తుంది, తుది ఉపయోగం వాణిజ్య లాభం కోసం కానంత వరకు మరియు అసలు పని సరైనదే అనే ఆవరణలో. సూచన.
గమనిక: మీరు పేజీకి సిఫార్సు చేసిన వ్యక్తికి మీరు ఇమెయిల్ చూడాలనుకుంటున్నారని మరియు అది స్పామ్ కాదని తెలుసుకోవడానికి మాత్రమే మేము మీ ఇమెయిల్ చిరునామాను అందించమని అడుగుతాము. మేము ఏ ఇమెయిల్ చిరునామాలను సంగ్రహించము.
మీరు సందర్శకులో ఉన్నారో లేదో పరీక్షించడానికి మరియు ఆటోమేటిక్ స్పామ్ సమర్పణను నిరోధించడానికి ఈ ప్రశ్న ఉపయోగించబడుతుంది.
ప్రత్యేక జీవక్రియల పోలిక మరియు పరీక్ష రక్షణ సిద్ధాంతాల అంచనాకు సమాచార సిద్ధాంతం సార్వత్రిక కరెన్సీని అందిస్తుంది.
ప్రత్యేక జీవక్రియల పోలిక మరియు పరీక్ష రక్షణ సిద్ధాంతాల అంచనాకు సమాచార సిద్ధాంతం సార్వత్రిక కరెన్సీని అందిస్తుంది.
©2021 అమెరికన్ అసోసియేషన్ ఫర్ ది అడ్వాన్స్‌మెంట్ ఆఫ్ సైన్స్. అన్ని హక్కులు ప్రత్యేకించబడ్డాయి. AAAS HINARI, AGORA, OARE, CHORUS, CLOCKSS, CrossRef మరియు COUNTERకి భాగస్వామి. సైన్స్ అడ్వాన్సెస్ ISSN 2375-2548.